Question

【題目】陳皮是一味傳統(tǒng)的中草藥，研究者從陳皮中分離出有益微生物，制成微生物制劑再應(yīng)用于陳皮的生產(chǎn)，有助于陳皮的防腐與風(fēng)味的維持．具體操作如圖，其中①～④表示過(guò)程．

研究者從陳皮中共分離純化得到23株菌株，分別標(biāo)為cp01﹣cp23，但沒(méi)有分離純化得到真菌．提取該23株菌株DNA，經(jīng)過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增后電泳（DNA在一定的電場(chǎng)力作用下，在凝膠中向正極泳動(dòng)，DNA分子越大，泳動(dòng)越慢），所得電泳圖譜如圖，其中M表示已知不同分子量的DNA，比照其大小可以粗略估算樣品DNA分子量的大�。�

（1）如上圖中過(guò)程③所用的接種方法是 ， 過(guò)程④的目的是 ， 所用的接種方法是 ． 整個(gè)操作過(guò)程均為無(wú)菌操作，所使用的器皿均滅過(guò)菌，其目的是 ．
（2）據(jù)題意分析，圖中的電泳方向是（由上至下/由下至上），圖中用圓圈標(biāo)出的DNA其分子量大小范圍在bp之間．
（3）已知同一類(lèi)群的菌株電泳后DNA圖譜一致，據(jù)圖分析，該23株菌株共分個(gè)類(lèi)群．其中，與cp12屬于同一類(lèi)群的有 ．
（4）陳皮樣品中沒(méi)有分離到真菌，可能的原因是（ ）（多選）
A.陳皮的處理對(duì)真菌有抑制作用
B.該陳皮樣品中可能沒(méi)有真菌
C.陳皮能夠抑制多種真菌的生長(zhǎng)
D.陳皮中的細(xì)菌對(duì)真菌有抑制作用
E.陳皮樣品無(wú)法為真菌提供碳源

Answer 1

【答案】
（1）稀釋涂布法；分離純化；平板劃線法；殺死微生物及芽孢
（2）由上至下；500～750
（3）4；cp18，cp19，cp23
（4）ABCD
【解析】解：（1）據(jù)圖分析，過(guò)程③培養(yǎng)達(dá)到的菌落均勻，所用的接種方法是稀釋涂布平板法，過(guò)程④是平板劃線法，目的是分離純化．無(wú)菌操作過(guò)程中的滅菌目的是殺死微生物細(xì)胞、孢子及芽孢．（2）依據(jù)題意和題圖，電泳方向是由上至下．圖中用圓圈標(biāo)出的DNA其分子量大小范圍對(duì)應(yīng)在500～750bp之間．（3）由于同一類(lèi)群的菌株電泳后DNA圖譜一致，據(jù)圖分析，該23株菌株共分4個(gè)類(lèi)群．cp12、cp18、cp19、cp23的DNA的分子量大致相同，應(yīng)該屬于同一類(lèi)群．（4）陳皮樣品中沒(méi)有分離到真菌，可能的原因有陳皮的處理對(duì)真菌有抑制作用、該陳皮樣品中可能沒(méi)有真菌、陳皮能夠抑制多種真菌的生長(zhǎng)或陳皮中的細(xì)菌對(duì)真菌有抑制作用．故選：ABCD．
所以答案是：（1）稀釋涂布法 分離純化 平板劃線法 殺死微生物及芽孢（2）由上至下 500～750（3）4 cp18，cp19，cp23（4）ABCD