Question

【題目】富集培養(yǎng)是從微生物混合群開始，對特定種的數(shù)量比例不斷增高而引向純培養(yǎng)的一種培養(yǎng)方法。從自然菌樣篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯（環(huán)境污染物）降解的關(guān)鍵酶，下圖示意用富集方法從土壤中分離聯(lián)苯降解菌的過程。請分析回答：

（1）①②③過程目的是___________________________。

（2）進行⑤過程的目的是_________________，可采用____________法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上。在⑤過程中，首先要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進行高壓蒸汽滅菌，目的是________________________________________。

（3）在⑥和⑦的實驗檢測過程中，作為對照組的是________________組，設(shè)置實驗組的目是_________________________________________________________________ 。

（4）若用此方法從土壤中分離自生固氮菌，菌落在平板上培養(yǎng)時間不宜過長的原因是__________________________。配置的培養(yǎng)基中所需的營養(yǎng)物質(zhì)有____________

A、碳源 B、氮源 C、生長因子 D、水分 E、無機鹽

（5）某同學(xué)在做微生物實驗時，不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起，請你寫出分離得到純度較高的自生固氮菌和酵母菌的實驗原理__________________________。

Answer 1

【答案】通過富集培養(yǎng)，增大聯(lián)苯降解菌（目的菌）的濃度（比例） 獲得聯(lián)苯降解菌的單個菌落（進一步分離純化目的菌） 稀釋涂布法 殺滅細(xì)菌和芽孢，防止雜菌干擾實驗結(jié)果 ⑦ 說明獲得的單菌落中沒有其它雜菌 自生固氮菌會分泌含氮化合物，引起雜菌生長 A（C）DE 自生固氮菌能在無氮培養(yǎng)基上生長繁殖，而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖

【解析】

（1）微生物培養(yǎng)的程序：a．器具的滅菌、b．培養(yǎng)基的配制、c．培養(yǎng)基的滅菌、倒平板、d．微生物接種、e．恒溫箱中培養(yǎng)、f．菌種的保存；在培養(yǎng)的過程中一定要注意無菌操作。
（2）選擇培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基是根據(jù)不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同而配制的。不同微生物對某些化學(xué)藥品的抵抗力不同，利用這些特點，我們便可配制出適于某些微生物生長而抑制其他微生物的選擇培養(yǎng)基，例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細(xì)菌和真菌的生長；根據(jù)對營養(yǎng)物質(zhì)的特殊的需求，可以選擇不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纖維素分解菌的碳源是纖維素。

（1）①②③過程目的是通過富集培養(yǎng)，增大聯(lián)苯降解菌（目的菌）的濃度（比例）。
（2）進行⑤過程的目的是獲得聯(lián)苯降解菌的單個菌落（進一步分離純化目的菌），可采用稀釋涂布法法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上；在⑤過程中，首先要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進行高壓蒸汽滅菌，目的是殺滅細(xì)菌和芽孢，防止雜菌干擾實驗結(jié)果。
（3）在⑥和⑦的實驗檢測過程中，⑦作為實驗的對照組，實驗組⑥能夠說明獲得的單菌落中沒有其它雜菌。
（4）由于自生固氮菌會分泌含氮化合物，引起雜菌生長，因此用此方法從土壤中分離自生固氮菌，菌落在平板上培養(yǎng)時間不宜過長．由于自身固氮菌能夠固定空氣的氮元素，因此在培養(yǎng)基中不加氮源可以起到選擇作用，但是碳源、生長因子、水分和無機鹽等仍然是必須的成分。
（5）自生固氮菌能在無氮培養(yǎng)基上生長繁殖，而酵母菌則不能，因此可以用無氮培養(yǎng)基篩選出自身固氮菌；而青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖，因此在含有青霉素的培養(yǎng)基中可以篩選出酵母菌。