Question

【題目】多環(huán)芳香烴（PAHs）是一類高毒性有機(jī)污染物，由于具有致癌性和致突變性而受到關(guān)注。實(shí)驗(yàn)小組從土壤中分離出能降解PAHs的細(xì)菌，并對其進(jìn)行培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。請回答下列問題:

（1）實(shí)驗(yàn)小組從富含PAHs的土壤中取樣后，放置在以PAHs為唯一碳源的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，其目的是________________________________。

（2）將PAHs降解菌的菌液稀釋105倍后取0.1mL分別涂布在3個(gè)平板中，經(jīng)培養(yǎng)，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是79個(gè)、57個(gè)和41個(gè)，則樣液中的活菌數(shù)是_________個(gè)/mL。也可以在顯微鏡下采用__________直接計(jì)數(shù)的方法統(tǒng)計(jì)樣液中PAHs降解菌的數(shù)量。

（3）若采用平板劃線法分離樣液中的PAHs降解菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過____________滅菌。在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液不宜過多，其原因是____________________________________。示意圖A和B中，圖____________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

（4）若某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落的平均數(shù)為201個(gè)，而空白對照組的1個(gè)平板上出現(xiàn)了3個(gè)菌落，該結(jié)果說明這次實(shí)驗(yàn)可能出現(xiàn)了____________________________。

Answer 1

【答案】 增加PAHs分解菌的濃度，以確保能從樣品中分離得到目的菌 5.9×107 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 灼燒 菌液過多會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積而不能獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的單菌落 B 雜菌污染

【解析】試題分析：選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率。檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，可以看出采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)。用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)。據(jù)圖分析，圖A表示的接種方法是平板劃線法，圖B表示的接種方法是稀釋涂布平板法。

（1）該實(shí)驗(yàn)的目的是從土壤中分離出能降解PAHs的細(xì)菌，因此實(shí)驗(yàn)小組從富含PAHs的土壤中取樣后，要放置在以PAHs為唯一碳源的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以增加PAHs分解菌的濃度，確保能從樣品中分離得到目的菌。

（2）已知PAHs降解菌的菌液稀釋了105倍，體積是0.1mL，三個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是79個(gè)、57個(gè)和41個(gè)，則樣液中的活菌數(shù)（79+57+41）÷3÷0.1×105=5.9×107個(gè)/mL。微生物計(jì)數(shù)也可以直接用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

（3）平板劃線法分離樣液中的PAHs降解菌時(shí)，接種環(huán)應(yīng)該用灼燒的方法滅菌；在涂布平板時(shí)，菌液過多會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積而不能獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的單菌落。據(jù)圖分析，圖A表示的是平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；圖B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

（4）若某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落的平均數(shù)為201個(gè)，而空白對照組的1個(gè)平板上出現(xiàn)了3個(gè)菌落，說明這次實(shí)驗(yàn)可能出現(xiàn)了雜菌污染。