Question

【題目】我國肝損傷病的發(fā)生率較高，據(jù)研究，不同濃度的胰島素對減緩肝

細(xì)胞損傷有保護作用，且胰島素濃度越高保護作用越強：LPS是一種導(dǎo)致肝損傷的常見物質(zhì)（用生理鹽水配制）�，F(xiàn)欲以大鼠為材料驗證上述結(jié)論，回答下列問題：

（1）材料制備：

①肝細(xì)胞懸液的制備：取某健康幼年大鼠的肝臟，適宜條件下取出剪碎再用______酶消化，經(jīng)多次洗滌離心處理得到分散的肝細(xì)胞，加入適宜的細(xì)胞培養(yǎng)液置于卡氏瓶和CO2培養(yǎng)箱中進行______培養(yǎng)，將培養(yǎng)得到的肝細(xì)胞懸液隨機分為5組，編號為A-E，每組均需再______，置于相同且適宜的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)備用。

②胰島素溶液：用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液，分別加入到C、D、E組的肝細(xì)胞懸液中。

（2）實驗方案及結(jié)果預(yù)期：

①A組作為空白對照組，則往B、C、D、E組還需加入等量的______。

②若本實驗的結(jié)果用細(xì)胞存活率作為檢測指標(biāo)，各組的存活細(xì)胞數(shù)先用______測出OD值，然后計算各組的細(xì)胞存活率=該組OD值/A組OD值*100%，不考慮細(xì)胞死亡對OD值的影響。

③用柱形圖表示各組的實驗結(jié)果。______

（3）實驗從細(xì)胞水平分析推測胰島素對減緩肝細(xì)胞損傷的機理可能有______（至少寫出二點）。

Answer 1

【答案】胰蛋白 原代 設(shè)置多個重復(fù)樣液 LPS 比色計 延緩細(xì)胞分裂、延緩細(xì)胞凋亡

【解析】

根據(jù)題意，該實驗的實驗?zāi)康臑轵炞C不同濃度的胰島素對減緩肝細(xì)胞損傷有保護作用，且胰島素濃度越高保護作用越強。實驗自變量為不同濃度的胰島素，因變量為細(xì)胞損傷程度，可以用細(xì)胞的存活率來表示；為了使實驗更具有科學(xué)性，需要設(shè)置空白對照組和經(jīng)作用后的對照組。

根據(jù)實驗?zāi)康摹�實驗設(shè)計原則和實驗的部分步驟，依據(jù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程，可進行如下操作：

（1）材料制備：

①肝細(xì)胞懸液的制備：取某健康幼年大鼠的肝臟，適宜條件下取出剪碎再用胰蛋白酶消化，經(jīng)多次洗滌離心處理得到分散的肝細(xì)胞，加入適宜的細(xì)胞培養(yǎng)液置于卡氏瓶和CO2培養(yǎng)箱中進行原代培養(yǎng)，將培養(yǎng)得到的肝細(xì)胞懸液隨機分為5組，編號為A-E，每組均需再設(shè)置多個重復(fù)樣液，置于相同且適宜的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)備用。

②胰島素溶液：用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液，分別加入到C、D、E組的肝細(xì)胞懸液中。

（2）實驗方案及結(jié)果預(yù)期：

①A組作為空白對照組，則往B、C、D、E組還需加入等量的LPS。

②若本實驗的結(jié)果用細(xì)胞存活率作為檢測指標(biāo)，各組的存活細(xì)胞數(shù)先用比色計測出OD值，然后計算各組的細(xì)胞存活率=該組OD值/A組OD值*100%，不考慮細(xì)胞死亡對OD值的影響。

③實驗結(jié)果應(yīng)為：胰島素濃度越高，細(xì)胞存活率越大，故用柱形圖表示各組的實驗結(jié)果：

（3）實驗從細(xì)胞水平分析推測胰島素對減緩肝細(xì)胞損傷的機理可能有延緩細(xì)胞分裂、延緩細(xì)胞凋亡等。