Question

【題目】如圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答：

(1)容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織。它一般取自______________________。

(2)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是__________ ，然后用________酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來(lái)，這樣做的目的是_______________________。

(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行，瓶中的培養(yǎng)基成分有_______________________________________等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后，有許多細(xì)胞衰老死亡，這是培養(yǎng)到第________代左右，這之前的培養(yǎng)稱為________。

(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用________處理，然后配制成________，再分裝。

Answer 1

【答案】動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織 剪碎 胰蛋白 使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸 葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、動(dòng)物血清、維生素 10 原代培養(yǎng) 胰蛋白酶 細(xì)胞懸液

【解析】

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
2.細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。
3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌、②添加一定量的抗生素、③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。
（3）溫度和PH：
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

（1）培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是這部分細(xì)胞的分化程度低，增殖能力強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。

（2）在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)應(yīng)盡量分散成單個(gè)細(xì)胞，便于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸進(jìn)行物質(zhì)交換，使細(xì)胞分散首先需要將組織塊剪碎，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以消化組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中盡量使培養(yǎng)基成分與體內(nèi)基本相同，所以需要添加葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。培養(yǎng)的過(guò)程分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩大階段，當(dāng)培養(yǎng)到第10代左右，出現(xiàn)許多細(xì)胞衰老死亡的現(xiàn)象，這之前的培養(yǎng)為原代培養(yǎng)。

（4）為了把B瓶中的細(xì)胞分散到C瓶中，需用胰蛋白酶處理。然后配制成細(xì)胞懸浮液，再分裝。