Question

【題目】高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，操作流程如下：采集樣品→富集培養(yǎng)→分離、純化培養(yǎng)→篩選高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌→保存?zhèn)溆谩?/span>

（1）從用途上來說，富集培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基；進行分離、純化培養(yǎng)時，要先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制成平板。此時所使用的培養(yǎng)基與富集培養(yǎng)時有所不同，其中添加了一定量的________。之后用______法接種，若該過程所得平板上的平均菌落數為50個，稀釋倍數為105時，則每毫升樣品中的細菌數為______個。

（2）培養(yǎng)基配置和滅菌時，滅菌與調節(jié)pH的先后順序是________；實驗室中常使用________（設備）對培養(yǎng)基滅菌。

（3）若菌落的大小大致相同，菌落發(fā)生的時間也相同，__________（填“能”或“不能”）僅根據菌落周圍透明圈的大小來判斷該菌落所產生的淀粉酶單位酶量酶活力的高低，理由是____________。

Answer 1

【答案】選擇 瓊脂 稀釋涂布平板 5×107 先調節(jié)pH，后滅菌 高壓蒸汽滅菌鍋 不能 透明圈的大小可能是不同菌落產生的酶量不同導致（或酶活力相同時，酶量越大，透明圈就越大

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。

2、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學成分	根據某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學藥品	依據微生物產生的某種代謝產物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

（1）該實驗的目的是篩選高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌。按功能分，題目中的富集培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基需以淀粉為唯一的碳源。進行分離、純化培養(yǎng)時，要先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制成平板。此時所使用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，其中添加了一定量的瓊脂。從液體菌種到固體平板的過程及菌落生長均勻可推知，過程①②為稀釋涂布平板法。每毫升樣品中的細菌數約為50÷0.1×105=5×107個。

（2）培養(yǎng)基配置和滅菌時，培養(yǎng)基在滅菌前先進行調節(jié)pH值，對培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌處理。

（3）酶活力相同時，酶量越大，透明圈就越大，透明圈的大小可能由不同菌落產生的酶量不同導致，因此若菌落的大小大致相同，菌落發(fā)生的時間也相同，不能僅根據菌落周圍透明的大小來判斷該菌落所產生的淀粉酶單位酶量酶活力的高低。