苦馬豆素(SW)因從灰苦馬豆中分離出來(lái)而得名,被認(rèn)為是未來(lái)的腫瘤治療藥物。以下是相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程及結(jié)果。

將等量的小鼠肝癌Hepal6細(xì)胞懸液,分別接種于若干個(gè)含有等量培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中;

將培養(yǎng)瓶放于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,靜置、去除上清液;

分別加入等量但含不同濃度SW的培養(yǎng)液,于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng);

分別在24 h、48 h、72 h時(shí)吸取培養(yǎng)液,觀察結(jié)果,得到不同濃度SW對(duì)細(xì)胞存活率影響曲線如圖所示。

請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

(1)培養(yǎng)箱中5% CO2的作用是______________________________________。

(2)處于間期的肝癌Hepal6細(xì)胞,其分子水平的主要變化是________________________________________________________________。

(3)步驟中需要設(shè)置對(duì)照組,對(duì)照組的處理方法應(yīng)為________。步驟中每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)置5個(gè)培養(yǎng)瓶同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng),計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值,這是為了________________,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確。

(4)分析圖中曲線可知,SW對(duì)肝癌Hepal6細(xì)胞作用效果的特點(diǎn)是①______________________________________________________________;

②__________________________________________________________

(5)將培養(yǎng)48 h的培養(yǎng)液離心,去除上清液后經(jīng)過(guò)一系列的處理及分析,得到培養(yǎng)48 h細(xì)胞數(shù)目及凋亡蛋白BaxBcl2的表達(dá)量如表所示:

SW

癌細(xì)胞數(shù)目

凋亡細(xì)胞數(shù)目

Bax蛋白

Bcl2蛋白

2/(μg·mL1)

+++

+++++

1/(μg·mL1)

++

+++

+++

++

0.5/(μg·mL1)

+++

++

++

+++

0/(μg·mL1)

++++

++++

注:的數(shù)量表示相對(duì)值的多少

據(jù)此推測(cè),SW可能是通過(guò)誘發(fā)癌細(xì)胞________來(lái)抑制腫瘤生長(zhǎng)的,其原因可能是SW促進(jìn)了癌細(xì)胞內(nèi)________________的表達(dá)。

 

【答案】

(1)維持培養(yǎng)液的pH

(2)DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成

(3)加入等量不含SW的培養(yǎng)液(或只加等量培養(yǎng)液) 減小誤差

(4)①SW濃度越高,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng) ②SW作用時(shí)間越長(zhǎng),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)(存活)的抑制作用越強(qiáng)

(5)凋亡 Bax蛋白基因

【解析】(1)培養(yǎng)箱中5% CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH

(2)肝癌細(xì)胞在分裂間期主要進(jìn)行DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成。

(3)該實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組應(yīng)加入等量不含SW的培養(yǎng)液。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)置5個(gè)培養(yǎng)瓶同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng),計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值的目的是減小誤差。

(5)由表格中的數(shù)據(jù)可以推測(cè),SW可能是通過(guò)誘發(fā)癌細(xì)胞凋亡來(lái)抑制腫瘤生長(zhǎng)的,其原因可能是SW促進(jìn)了癌細(xì)胞內(nèi)Bax蛋白(凋亡蛋白)基因的表達(dá)。

 

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