Question

【題目】研究人員采用固定化微生物技術(shù)消除河道黑臭底泥和改善水質(zhì)，將乳酸菌、酵母菌群、光合菌群等多種微生物包埋在固體顆粒中制成Ⅰ型和Ⅱ型微生物載體顆粒，如下圖所示。

（1）篩選光合菌群時，培養(yǎng)基成分中無需添加______，培養(yǎng)乳酸菌、酵母菌群、光合菌群時需要無氧條件的是______。

（2）在培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中含有蛋白胨、K2HPO4、NaCl、葡萄糖和水，其中可作為碳源的有______。培養(yǎng)微生物前，宜采用______方法對接種環(huán)進行滅菌。完成下圖甲所示操作，至少需要灼燒接種環(huán)______次。

（3）若研究人員用圖乙所示方法分離培養(yǎng)微生物，該方法稱為______，用______共吸取0.4ml菌液（假設(shè)稀釋倍數(shù)為106）平均等量接種到4個平板上，放入______培養(yǎng)一段時間后， 平板上長出的菌落數(shù)分別為156、462、178和191。則每1ml菌液中的酵母菌數(shù)量為______

（4）下圖為試驗場內(nèi)水體不同深度處DO（水中溶氧量）隨時間的變化情況。

在試驗場內(nèi)系統(tǒng)運行80 天左右，除20 cm以下深度外，其余深度處DO均大于1.5 mg/L，且DO呈上升趨勢，主要由于微生物載體中包埋的______能使水體DO升高，DO的升高能促進微生物載體中包埋的______以及水體中好氧菌的繁殖，致使試驗場內(nèi)降解有機物的速率和能力得到提高。

Answer 1

【答案】碳源 乳酸菌 蛋白胨、葡萄糖 灼燒 6 稀釋涂布平板法 移液管 恒溫培養(yǎng)箱 1.75×109 光合細菌 酵母菌

【解析】

1、從混合樣品中獲得某種微生物的方法通常有兩種：
第一種是可利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質(zhì)有一“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入或不加該營養(yǎng)物質(zhì)，從而使它成為一種選擇培養(yǎng)基（如在含高濃度NaCl的培養(yǎng)基上分離金黃色葡萄糖球菌，在不含N的培養(yǎng)基上分離圓褐固氮菌）；或根據(jù)分離對象對pH、溫度和氧氣濃度的喜好，改變培養(yǎng)環(huán)境的理化性質(zhì)，使環(huán)境條件最適宜該微生物的生存，從而達到分離的目的，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。
第二種辦法可利用該分離對象對某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物，經(jīng)培養(yǎng)后，原來占優(yōu)勢的微生物生長受抑制，而分離對象卻可乘機大大增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢（如在加入青霉素的培養(yǎng)基上分離真核微生物）。

2、統(tǒng)計平板上菌落數(shù)時，為了保證實驗結(jié)果的準確性，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。

（1）篩選光合菌群時，培養(yǎng)基成分中無需添加碳源，因為光合菌群可利用二氧化碳和水合成有機物。酵母菌為兼性厭氧型，乳酸菌為厭氧型，故培養(yǎng)乳酸菌、酵母菌群、光合菌群時需要無氧條件的是乳酸菌。
（2）酵母菌為異養(yǎng)微生物，培養(yǎng)基中的蛋白胨、K2HPO4、NaCl、葡萄糖和水中，其中可作為碳源的有蛋白胨、葡萄糖。接種前對接種環(huán)進行滅菌宜采用灼燒滅菌的方法。圖中共劃線五個區(qū)域，每次劃線前后均要對接種環(huán)灼燒，故完成圖中所示操作，至少需要灼燒接種環(huán)6次。
（3）根據(jù)圖乙中所示的菌落分布特點可知，該接種方法為稀釋涂布平板法，用移液管共吸取0.4ml菌液（假設(shè)稀釋倍數(shù)為106）平均等量接種到4個平板上，即每個平板上接種0.1ml菌液，放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的菌落數(shù)分別為156、462、178和191，由于計數(shù)時應(yīng)選擇菌落數(shù)在30～300之間的，故每1ml菌液中的酵母菌數(shù)量為（156+178+191）÷0.1×106=1.75×109個。
（4）在試驗場內(nèi)系統(tǒng)運行80天左右，除20cm以下深度外，其余深度處DO均大于1.5mg/L，且DO呈上升趨勢，主要是由于微生物載體中包埋的光合細菌進行光合作用產(chǎn)生了氧氣使水體DO升高，而DO的升高又能促進微生物載體中包埋的酵母菌以及水體中好氧菌的繁殖，致使試驗場內(nèi)降解有機物的速率和能力得到提高。