Question

【題目】為解決塑料袋造成的“白色污染”這一問(wèn)題，某同學(xué)試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解過(guò)程的目的菌，以下是該同學(xué)從土壤中尋找并篩選目的菌的流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是____________________。在接種前需要檢測(cè)使用的培養(yǎng)基是否被污染，方法是________________________。

（2）Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于________________（按功能分）培養(yǎng)基，其作用是使目的菌能“脫穎而出”。如圖采用的接種方法為________________。Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基從物理性質(zhì)來(lái)看，________（填“能”或“不能”）添加瓊脂。

（3）該同學(xué)在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為20.4，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是________個(gè)。（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2mL）

（4）假設(shè)該同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過(guò)多而連成一片,說(shuō)出一種可能的原因并提出合理的處理措施。原因:______________；措施:________________________________。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌法 將未接種的培養(yǎng)基在37℃（或適宜溫度）恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時(shí)間（或1～2天），觀察是否有菌落生成 選擇 稀釋涂布平板法 不能 1.02×106 菌液濃度過(guò)高（或稀釋倍數(shù)不夠）可以通過(guò)增大稀釋倍數(shù)解決（或原因：培養(yǎng)過(guò)程中被雜菌污染） 嚴(yán)格無(wú)菌操作程序

【解析】試題分析：本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，微生物這部分內(nèi)容是高考試題的一個(gè)熱點(diǎn)一般體現(xiàn)在對(duì)生物工程中的應(yīng)用，考查的知識(shí)點(diǎn)有微生物的無(wú)菌操作、微生物的分離以及產(chǎn)品的提取，注意總結(jié)。

（1）培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。在接種前需要檢測(cè)使用的培養(yǎng)基是否被污染，可以將未接種的培養(yǎng)基在37℃（或適宜溫度）恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察是否有菌落生成，若有菌落生成，則已經(jīng)被污染，否則沒(méi)有被污染。
（2）要篩選能降解聚乙烯塑料的微生物，應(yīng)選擇以聚乙烯塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。圖Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上采用的接種方法為稀釋涂布平板法。Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此不需要加凝固劑--瓊脂。
（3）根據(jù)題意可知，每克樣品中的菌落數(shù)=平板上菌落數(shù)的平均值÷體積×稀釋倍數(shù)=20.4÷0.2×104=1.02×106個(gè)。
（4）如果培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過(guò)多連成一片，可能的原因是菌液濃度過(guò)高或操作過(guò)程不是無(wú)菌操作，還可能是接種時(shí)沒(méi)有把細(xì)菌分散開(kāi)，采取的措施有：可以通過(guò)增大稀釋倍數(shù)解決（或培養(yǎng)過(guò)程中被雜菌污染；嚴(yán)格無(wú)菌操作程序。或利用接種針劃線時(shí)，劃下一個(gè)區(qū)域前沒(méi)有對(duì)接種針滅菌處理；每劃一個(gè)新的區(qū)域都要對(duì)接種針進(jìn)行滅菌處理）。