Question

【題目】下圖是某課題小組設(shè)計(jì)的“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”的實(shí)驗(yàn)流程示意圖。回答下列問題。

(1)微生物接種的方法有很多，該圖所示為____法，這一方法常用來統(tǒng)計(jì)樣品中____________（填“活菌”、“死菌”或“活菌和死菌”）的數(shù)目。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 ___的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比細(xì)菌的實(shí)際數(shù)目低， 這是因?yàn)?/span>____。

(2)實(shí)驗(yàn)過程中，需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的方法是____。接種操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行，目的是防止____。

(3)對(duì)分離得到的分解尿素的細(xì)菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)，可在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。其鑒定原理是____。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板 活菌 30—300 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 高壓蒸汽滅菌 雜菌污染 分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，指示劑變紅

【解析】

稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

(l)微生物接種的方法有很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，該圖所示為稀釋涂布平板法，這一方法常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30—300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比細(xì)菌的實(shí)際數(shù)目低， 這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

(2)常見的滅菌方法有：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，實(shí)驗(yàn)過程中，需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的方法是高壓蒸汽滅菌。接種操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行，酒精燈火焰附近存在無菌區(qū)域，目的是防止雜菌污染。

(3)在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。對(duì)分離得到的分解尿素的細(xì)菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)，可在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。其鑒定原理是分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，指示劑變紅。