Question

【題目】豬O型口蹄疫是由O型口蹄疫病毒（FMDV）引起的急性、熱性、高度接觸性傳染病，還可感染牛、羊等偶蹄動(dòng)物。VP1結(jié)構(gòu)蛋白是該病毒的主要抗原，下圖是科學(xué)家設(shè)想利用基因工程技術(shù)培育番茄幼苗的過程。請回答下列問題：

（1）基因工程中，除去質(zhì)粒外，可作為目的基因運(yùn)載體的還有___________和___________。

（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌前，用Ca2+處理農(nóng)桿菌使其成為___________細(xì)胞。為了篩選得到含有VP1基因的受體細(xì)胞，可在培養(yǎng)基中添加___________。

（3）過程⑤⑥分別是___________和___________。將試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時(shí)，需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，能有效避免___________的污染。植物微型繁殖技術(shù)能保持品種的___________。

Answer 1

【答案】動(dòng)植物病毒 λ噬菌體的衍生物 感受態(tài) 卡那霉素 脫分化 再分化 微生物 優(yōu)良性狀

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）常見的運(yùn)載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒和λ噬菌體的衍生物等。

（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌前，需要用適當(dāng)?shù)?/span>Ca2+處理農(nóng)桿菌使其處于感受態(tài)。重組質(zhì)粒上含有卡那霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，因此可在培養(yǎng)基中添加卡那霉素用于篩選得到含有VP1基因的受體細(xì)胞。

（3）過程⑤是將番茄葉片小段的外植體進(jìn)行脫分化形成愈傷組織，過程⑥則為再分化。植物組織培養(yǎng)需要無菌操作，防止微生物污染。植物微型繁殖技術(shù)屬于無性繁殖，能保持品種的優(yōu)良性狀。