Question

研究表明，廣泛存在于植物細(xì)胞中的原花青素有較強(qiáng)的抗癌作用。下面是有關(guān)的研究實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)一  為研究原花青素對(duì)人類肝癌細(xì)胞的作用，將實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，分別加入不同濃度的原花青素溶液。48小時(shí)后，檢測(cè)處于細(xì)胞周期不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)量，得到的數(shù)據(jù)如下表。請(qǐng)回答問題。

（1）細(xì)胞培養(yǎng)箱中應(yīng)含有5%的CO₂，目的是____    與細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)達(dá)到70%時(shí)，要用____處理后分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)，這是為了避免              。

（2）癌細(xì)胞的最主要特征是____。表中數(shù)據(jù)顯示，隨著加入原花青素濃度的增加，    期細(xì)胞的比例逐漸增加，      期明顯減少，    期減少至基本消失。表明原花青素能            。

實(shí)驗(yàn)二  原花青素的抗癌作用還表現(xiàn)在還能清除生物體內(nèi)的亞硝酸鹽。為了探究葡萄籽中提取的原花青素溶液清除亞硝酸鹽的最適濃度，請(qǐng)完善以下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

實(shí)驗(yàn)材料：提取劑、原花青素提取液、0．4%對(duì)氨基苯磺酸溶液（顯色劑1）、0．2%的N-l-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液（顯色劑2）、5 μg/mL的亞硝酸鈉溶液、分光光度計(jì)等其他必需器材。

實(shí)驗(yàn)原理：①亞硝酸鈉與顯色劑l和2反應(yīng)生成    色產(chǎn)物，用分光光度計(jì)測(cè)出反應(yīng)后溶液的吸光度A₀。向亞硝酸鈉液中加入原花青素提取液后再進(jìn)行上述反應(yīng)，測(cè)定吸光度A、。則亞硝酸鹽的清除率可以按下式計(jì)算：清除率=（A₀—A_x）／A₀×l00%。

 ②比較        ，得出原花青素溶液清除亞硝酸鹽的最適濃度。

實(shí)驗(yàn)步驟：

 ①取6支25ml的比色管，編號(hào)為1～6號(hào)。

 ②向l號(hào)管中加入0．5ml亞硝酸鈉溶液和l0ml不含原花青紊的提取劑，再依次加入顯色劑1和2，用蒸餾水稀釋至刻度，靜置一段時(shí)間后，用分光光度計(jì)測(cè)550nm處吸光度并記錄。

③____                        。

④計(jì)算不同濃度原花青素溶液對(duì)豫硝酸鹽的清除率，比較并得出結(jié)論。

 

Answer 1

【答案】

實(shí)驗(yàn)一

（1）維持培養(yǎng)液的pH  胰蛋白酶  接觸抑制

（2）能無限增殖  G1  S  G2/M  抑制人肝癌細(xì)胞的增殖，使其停留在G1期

實(shí)驗(yàn)二

實(shí)驗(yàn)原理：①玫瑰紅  ②不同濃度的原花青素溶液對(duì)豫硝酸鹽的清除率

實(shí)驗(yàn)步驟：③向2~6號(hào)管中加入0．5ml亞硝酸鈉溶液和l0ml不同濃度的原花青紊的提取劑，其余步驟同②

【解析】

試題分析： (1)細(xì)胞培養(yǎng)過程中通入5%的CO2，H₂O+CO₂=H⁺+HCO3^-,維持培養(yǎng)液中的pH，與細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)達(dá)到70%時(shí)，要用胰蛋白酶處理后分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)，這是為了避免細(xì)胞接觸抑制；（2）癌細(xì)胞具有無限增殖、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著性變化，細(xì)胞表面糖蛋白減少，黏著性降低，容易在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)，最主要特征是惡性增殖；隨著加入原花青素濃度的增加，G1期細(xì)胞的比例逐漸增加，S期明顯減少，G2/M期減少至基本消失。表明原花青素能抑制癌細(xì)胞增殖，使其停在G1期。①要測(cè)出不加花青素是的OA值，作為對(duì)照，然后比較不同濃度花青素溶液對(duì)亞硝酸鹽作用后的OA值，計(jì)算清除效率，得出最適濃度。

考點(diǎn)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞癌變等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力。