Question

30.（18分）斑馬魚的酶D由17號(hào)染色體上的D基因編碼。具體純合突變基因（dd）的斑馬魚胚胎會(huì)發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白（G）基因整合到斑馬魚17號(hào)染色體上，

帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對(duì)應(yīng)位點(diǎn)表示為g。用個(gè)體

M和N進(jìn)行如下雜交實(shí)驗(yàn)

（1）在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中，將G基因與質(zhì)粒重組，需要的兩類酶是       和       。將

重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚           中,整合到染色體上的G基因               后，

使胚胎發(fā)出綠色熒光。

（2）根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)推測(cè)

代M的基因型是            （選填選項(xiàng)前的符號(hào)）

a. DDGG      b. DDGg      c. DdGG         d. DdGg

（3）雜交后，出現(xiàn)紅·綠熒光（既有紅色又有綠色熒光）胚胎的原因是親代           （填

“M”或“N”）的初級(jí)精（卵）母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中，同源染色體的           發(fā)生了交換，導(dǎo)致染色體上的基因重組。通過記錄子代中紅·綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù)，可計(jì)算得到該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比例，算式為            

Answer 1

【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶  DNA連接酶    受精卵  表達(dá)

（2）①b    ②b、d

（3）N   非姐妹染色單體   4×

【解析】（1）將目的基因綠色熒光蛋白基因G與質(zhì)粒結(jié)合，首先需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒，然后用DNA連接酶連接目的基因與質(zhì)粒，使之形成重組質(zhì)粒。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入斑馬魚的受精卵中，整合到斑馬魚染色體上的目的基因G在斑馬魚胚胎細(xì)胞中表達(dá)會(huì)產(chǎn)生綠色熒光蛋白，使胚胎出現(xiàn)綠色熒光。

（2）由于M和N的后代中出現(xiàn)了紅·綠熒光（dd G_）個(gè)體，且綠色熒光個(gè)體N的基因型為DdGg，故無熒光個(gè)體M一定含有d基因，不含有G基因，故M基因型一定為Ddgg。根據(jù)M（Ddgg）與N（DdGg）交配產(chǎn)生的只發(fā)出綠色熒光的胚胎一定含有G，故基因型包括DDGg、DdGg。

（3）M基因型為Ddgg，N基因型為DdGg，由于子代出現(xiàn)了紅·綠熒光個(gè)體，且說明d基因與G基因整合在同一條染色體，故該胚胎產(chǎn)生的原因是親本N減數(shù)分裂過程中同源染色體非姐妹染色單體交叉互換導(dǎo)致d和G基因同時(shí)整合在同一條17號(hào)染色體上。