Question

【題目】CTLA-4是人體中一種能夠抑制T細(xì)胞增殖的蛋白質(zhì)�？茖W(xué)家通過單克隆抗體制備技術(shù)來生產(chǎn)CTLA-4抗體，用于增強(qiáng)T細(xì)胞對(duì)腫瘤的免疫反應(yīng)，方法如下：

（1）將___________注入小鼠體內(nèi)，從免疫小鼠體內(nèi)分離獲得淋巴細(xì)胞，與___________進(jìn)行融合，再用___________進(jìn)行篩選獲得雜交瘤細(xì)胞。該細(xì)胞的特點(diǎn)是___________。對(duì)上述細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和___________，經(jīng)過一系列篩選獲得可大規(guī)模培養(yǎng)的細(xì)胞群體。

（2）臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，利用小鼠制備的單克隆抗體（鼠源單克隆抗體）具有外源性，容易被人體免疫系統(tǒng)清除。抗體結(jié)構(gòu)如圖所示，抗體與抗原特異性結(jié)合的區(qū)域是V區(qū)，引起人體免疫反應(yīng)的主要是C區(qū)�？茖W(xué)家通過設(shè)計(jì)“人鼠嵌合抗體”來解決這一問題。從人體中獲取編碼抗體___________（填“C區(qū)”或“V區(qū)”）序列的基因，然后從雜交瘤細(xì)胞中提取編碼鼠源單克隆抗體___________（填“C區(qū)”或“V區(qū)”）序列的基因，對(duì)兩種基因進(jìn)行修飾、拼接，利用運(yùn)載體將重組基因?qū)�入骨髓瘤�?xì)胞，并進(jìn)行培養(yǎng)，獲取人鼠嵌合抗體。設(shè)計(jì)并制備人鼠嵌合抗體屬于___________（生物工程）。

（3）與鼠源單克隆抗體相比，人鼠嵌合抗體的優(yōu)點(diǎn)是___________。

Answer 1

【答案】CTLA-4（或“CTLA-4蛋白”） 骨髓瘤細(xì)胞 特定的選擇培養(yǎng)基 既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體 專一抗體檢測(cè) C區(qū) V區(qū) 蛋白質(zhì)工程 既保留單克隆抗體的高特異性又降低人體對(duì)鼠源單克隆抗體的免疫排斥，從而提高治療效果

【解析】

1、單克隆抗體

(1)制備過程

(2)優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。

(3)用途：作為診斷試劑；用于治療疾病和運(yùn)載藥物。

2、蛋白質(zhì)工程

(1)流程圖：

A．轉(zhuǎn)錄，B.翻譯，C.分子設(shè)計(jì)，D.多肽鏈，E.預(yù)期功能。

(2)結(jié)果：改造了現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造出新的蛋白質(zhì)。

(3)應(yīng)用：主要集中應(yīng)用于對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，改良生物性狀。

（1）由單克隆抗體的制備流程可知，將CTLA-4注入小鼠體內(nèi)，從免疫小鼠體內(nèi)分離獲得淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選獲得既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體的雜交瘤細(xì)胞，對(duì)上述細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，經(jīng)過一系列篩選獲得可大規(guī)模培養(yǎng)的細(xì)胞群體。

（2）抗體結(jié)構(gòu)如圖所示，抗體與抗原特異性結(jié)合的區(qū)域是V區(qū)，引起人體免疫反應(yīng)的主要是C區(qū)。據(jù)蛋白質(zhì)工程流程，科學(xué)家從人體中獲取編碼抗體C區(qū)序列的基因，然后從雜交瘤細(xì)胞中提取編碼鼠源單克隆抗V區(qū)序列的基因，對(duì)兩種基因進(jìn)行修飾、拼接，利用運(yùn)載體將重組基因?qū)�入骨髓瘤�?xì)胞，并進(jìn)行培養(yǎng)，獲取人鼠嵌合抗體。

（3）鼠源單克隆抗體具有外源性，容易被人體免疫系統(tǒng)清除。通過C區(qū)改造的人鼠嵌合抗體既保留單克隆抗體的高特異性又降低人體對(duì)鼠源單克隆抗體的免疫排斥，從而提高治療效果。