Question

【題目】食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789．40—2016是奶粉中可能含有的細(xì)菌克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）的檢測標(biāo)準(zhǔn)，其流程如下，請回答：

（1）①過程中的BPW培養(yǎng)基為_________（填“固體”“液體”或“半固體”）培養(yǎng)基。

（2）②選擇培養(yǎng)時，mLST - Vm培養(yǎng)基中添加的萬古霉素是一種抗生素，分析可得，克羅諾桿菌屬對該抗生素_____________（填“敏感”或“不敏感”）。

（3）由于②的培養(yǎng)產(chǎn)物細(xì)菌濃度未知，為避免對其進(jìn)行稀釋的工作，從②轉(zhuǎn)移至③培養(yǎng)時，需采用的接種方法為_____________________。③過程所需的顯色培養(yǎng)基在制備時的次序是______________________。

A．調(diào)節(jié)pH B．稱量藥品 C．溶解 D．倒平板 E．滅菌

（4）倒平板時一般將培養(yǎng)基溫度降至_______℃左右。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，其操作順序應(yīng)該是_____________。

①加水②排冷氣③裝置滅菌物品④100kPa下滅菌⑤加蓋⑥0kPa下排氣，打開滅菌鍋．

（5）克羅諾桿菌屬能產(chǎn)生黃色素，積累到一定量的時候，可使整個菌落呈現(xiàn)黃色，據(jù)此，除注釋中的成分外，TSA培養(yǎng)基中還應(yīng)包含________________。

（6）食品安全關(guān)系每個人的生命，對一種細(xì)菌的鑒定程序也相當(dāng)嚴(yán)格。在上述檢驗程序中，步驟________________（填序號）對克羅諾桿菌屬具有一定的選擇或鑒定作用。

Answer 1

【答案】液體 不敏感 劃線（接種）法； BCAED 50 ①③⑤②④⑥ 瓊脂（或瓊脂糖） ②③④⑤

【解析】

1．培養(yǎng)基的成分包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源等。

2．制備固體培養(yǎng)基的基本過程為計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板五個步驟。

3．選擇培養(yǎng)基的原理：根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率。

（1）要擴(kuò)大培養(yǎng)，一般為液體培養(yǎng)基。

（2）本實驗的最終目標(biāo)是篩選出克羅諾桿菌屬，因此步驟②中的萬古霉素需要將克羅諾桿菌屬保留下來，并盡可能多的殺滅其他雜菌，因此克羅諾桿菌屬對萬古霉素不敏感。

（3）檢測樣品中的細(xì)菌數(shù)量不確定，因此，經(jīng)過①②培養(yǎng)后，菌液中的密度大小不確定，若采用涂布分離法，需要一個合適的稀釋濃度，這樣增大了操作流程，為避免對菌液進(jìn)行稀釋的工作流程，可采用劃線法進(jìn)行接種，因為接種環(huán)在平板上劃線到末端時，一般可形成單菌落，由分析可知，制備培養(yǎng)基的基本流程為計算、稱量、溶解、調(diào)節(jié)pH、滅菌以及倒平板，故制備培養(yǎng)基的流程為BCAED。

（4）倒平板時一般將培養(yǎng)基溫度降至50℃左右。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，其操作順序應(yīng)該是①加水，③裝置滅菌物品，⑤加蓋②排冷氣④100kPa下滅菌⑥0kPa下排氣，打開滅菌鍋。

（5在TSA培養(yǎng)基上最后要提取菌落，TSA培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，配方中應(yīng)該含有瓊脂。

（6）國家安全標(biāo)準(zhǔn)相當(dāng)嚴(yán)格，上述流程中的②③④⑤在一定程度上都在對克羅諾桿菌屬進(jìn)行選擇或鑒定，以確保檢測的準(zhǔn)確性。