Question

研究發(fā)現(xiàn)：端粒在不同物種細(xì)胞中對于保持染色體穩(wěn)定性和細(xì)胞活性有重要作用，端粒酶是一種逆轉(zhuǎn)錄酶，能延長縮短的端粒（縮短的端粒其細(xì)胞復(fù)制能力受限），從而增強體外細(xì)胞的增殖能力。端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制，在腫瘤中被重新激活，端粒酶可能參與惡性轉(zhuǎn)化�？茖W(xué)家通過探究DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶的活性，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長增殖以尋找一種抑制腫瘤細(xì)胞的新途徑。
方法思路：
①構(gòu)建干擾質(zhì)粒                  （插入針對人體端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶亞基（hTERT）的mRNA的干擾序列）和對照質(zhì)粒PSG—CTR（插入不針對人體任何mRNA序列的對照組序列）。
②將空質(zhì)粒PSG（不含目的基因）、干擾質(zhì)粒和對照質(zhì)粒分別感染肝癌細(xì)胞。
③一段時間后觀察檢測細(xì)胞的                            。計算細(xì)胞凋亡率，繪制肝癌細(xì)胞生長曲線。結(jié)果如下圖：

請回答：
（1）完成實驗步驟中的空格：
①                       ；②                       。
（2）在構(gòu)建質(zhì)粒時，要將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞并用              培養(yǎng)基進(jìn)行篩選鑒定，然后再提取。因此，在構(gòu)建的表達(dá)載體質(zhì)粒上必須含有               。
（3）端粒酶可以通過以自身的          為模板，                   為原料來合成端粒DNA。
（4）根據(jù)題意請分析實驗結(jié)果并得出結(jié)論。
                                                                       
                                                                    。

Answer 1

（1）①PSG－AS ③端粒酶活性、細(xì)胞凋亡情況、細(xì)胞生長情況
（2）選擇 標(biāo)記基因
（3）RNA   4種脫氧核苷酸
（4）從結(jié)果可知PSG-AS導(dǎo)入肝癌細(xì)胞發(fā)揮作用后，端粒酶活性降低，細(xì)胞凋亡率升高，細(xì)胞生長受抑制，說明通過DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶活性的方法，能較好抑制腫瘤細(xì)胞。

解析