Question

【題目】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：

（1）在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需兩次用到胰蛋白酶，第一次使用的目的是將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，此次的胰蛋白酶也可用__________酶代替。由于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)具有__________、__________現(xiàn)象，因此需第二次用該酶處理，然后分瓶培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，目的是___________________。

（2）目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為__________代以內(nèi)的細(xì)胞，以保持細(xì)胞正常的__________核型。

（3）在單克隆抗體制備過程中，將獲得______________________________(答出兩個(gè)特點(diǎn))的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行______培養(yǎng)和抗體檢測以后，再經(jīng)過多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。

Answer 1

【答案】膠原蛋白 貼壁生長（細(xì)胞貼壁） 接觸抑制 清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害 10 二倍體 既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖 克隆化

【解析】

1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
2、單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體。

（1）胰蛋白酶和膠原蛋白酶都可以將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，所以胰蛋白酶也可用膠原蛋白酶代替。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)具有貼壁生長、接觸抑制現(xiàn)象，所以培養(yǎng)過程中還需要用胰蛋白酶處理。在培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。
（2）目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)的細(xì)胞，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。
（3）在單克隆抗體制備過程中，將獲得既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測以后，再經(jīng)過多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。