回答關(guān)于基因工程的問(wèn)題
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一種偶蹄動(dòng)物傳染病,目前常用接種弱毒疫苗的方法預(yù)防。疫苗的主要成分是該病毒的一種結(jié)構(gòu)蛋白VP1?茖W(xué)家嘗試?yán)棉D(zhuǎn)基因番茄來(lái)生產(chǎn)口蹄疫疫苗,過(guò)程如下圖所示
(1)口蹄疫病毒的VP1蛋白進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi),能引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。VP1蛋白在免疫反應(yīng)中稱為 。
(2)口蹄疫病毒的遺傳物質(zhì)為RNA,要獲得VP1基因可用 的方法合成DNA,再用限制性核酸內(nèi)切酶將VP1基因片段切下。
(3)如下圖所示,若用2種識(shí)別切割序列完全不同的限制酶E和F從合成的DNA上切下VPI目的基因,并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000對(duì)堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域 (0.2kb),那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2___________。
A.既能被E也能被F切開(kāi) B.能被E但不能被F切開(kāi)
C.既不能被E也不能被F切開(kāi) D.能被F但不能被E切開(kāi)
(4)已知在質(zhì)粒pZHZl中,限制酶G切割位點(diǎn)距限制酶E切割位點(diǎn)0.8kb,限制酶H切割位點(diǎn)距限制酶F切割位點(diǎn)O.5kb。若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣品,據(jù)下表所列酶切結(jié)果判斷VPI目的基因的大小為 kb;并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點(diǎn)標(biāo)注在下圖中。
(5)上述目的基因模板鏈中的TGA序列對(duì)應(yīng)1個(gè)密碼子,翻譯時(shí)識(shí)別該密碼子的tRNA上相應(yīng)的堿基序列是 。
(6)過(guò)程⑥的培養(yǎng)基中除了加入各種必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和 等激素外,還需要添加 篩選出含有重組質(zhì)粒的葉片小段。
(7)獲得表達(dá)VP1蛋白的番茄植株以后,需要進(jìn)行免疫效力的測(cè)定。具體方法是:將轉(zhuǎn)基因番茄葉片提取液注射到豚鼠體內(nèi),每半個(gè)月注射1次,3次后檢測(cè)豚鼠血液內(nèi)產(chǎn)生的 的數(shù)量。為了使結(jié)果可信,應(yīng)設(shè)2組對(duì)照,分別注射 和 。
(1)抗原
(2)逆轉(zhuǎn)錄
(3)A
(4) 1.2
(5)UGA
(6)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 卡那霉素
(7)特異性抗體 未轉(zhuǎn)基因的番茄葉片提取液 弱毒疫苗
【解析】
試題分析:(1)能引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)成為抗原;(2)由RNA指導(dǎo)合成DNA的過(guò)程稱為逆轉(zhuǎn)錄,DNA指導(dǎo)合成RNA稱為轉(zhuǎn)錄;(3)一種限制性內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子,完全不同的限制酶E和F從合成的DNA上切下VPI目的基因,并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(上相應(yīng)的E—F區(qū)域 (0.2kb),所以重組質(zhì)粒中同時(shí)含有EF切割位點(diǎn),答案選A;(4)由酶切結(jié)果可推測(cè)目的基因內(nèi)部也有限制酶G和H的識(shí)別位點(diǎn),設(shè)限制酶G的識(shí)別位點(diǎn)距E點(diǎn)有a kb,距F點(diǎn)有bkb;限制酶H的識(shí)別位點(diǎn)距E點(diǎn)有c kb,距F點(diǎn)有dkb;則有0.8+a=1.6,d+0.5=1.2;GH大半環(huán)之間距離為3.7-0.2-0.8-0.5=2.2,有b+0.5+2.2=3.1,c+0.8+2.2=3.5,a=0.8、b=0.4、c=0.5、d=0.7,a+b=c+d=1.2。
(5)根據(jù)堿基配對(duì)原則,TGA序列對(duì)應(yīng)的密碼子是ACU,密碼子ACU對(duì)應(yīng)的tRNA上的反密碼子是UGA。(6)過(guò)程⑥為植物組織培養(yǎng),需要的植物激素包括生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等。(7)本實(shí)驗(yàn)的自變量為是否注射含有VP1蛋白的提取液;未轉(zhuǎn)基因的番茄葉片提取液不含VP1蛋白。要證明VP1蛋白起疫苗的作用,可設(shè)置注射弱毒疫苗的對(duì)照組做比較。
考點(diǎn):本題旨在考查基因工程的原理及技術(shù)、基因工程的應(yīng)用和細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容,意在考查關(guān)注對(duì)科學(xué)、技術(shù)和社會(huì)發(fā)展有重大影響和意義的生物學(xué)新進(jìn)展以及生物科學(xué)發(fā)展史上的重要事件,理論聯(lián)系實(shí)際,綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問(wèn)題。
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科目:高中生物 來(lái)源:2011屆上海市寶山區(qū)高三上學(xué)期期末考試生物試卷 題型:綜合題
回答下列關(guān)于基因工程的問(wèn)題
下圖1是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線,表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。
(1)若對(duì)圖2中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性如何變化,為什么?
(2)圖中將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒,可以只用EcoR I同時(shí)酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因,也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因,后一個(gè)方法的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 。
(3)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入 酶。重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。
(4)圖1過(guò)程①可采用的操作方法是 ,過(guò)程②可采用的生物技術(shù)是 。過(guò)程③可采用的生物技術(shù)是 。
(5)分別從分子水平簡(jiǎn)述雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過(guò)程是_______________。
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科目:高中生物 來(lái)源:2012-2013學(xué)年江蘇省高三最后一次模擬考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
回答下列關(guān)于基因工程的問(wèn)題。
草甘膦是一種廣譜除草劑,其除草機(jī)制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成,最終導(dǎo)致植物死亡。但是,它的使用有時(shí)也會(huì)影響到植物的正常生長(zhǎng)。目前,已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因,若將該基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi),從而獲得的轉(zhuǎn)基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。
下圖A-F表示6株植物,其中,植物A和D對(duì)草甘膦敏感,B和E對(duì)草甘膦天然具有抗性,C和F則經(jīng)過(guò)了轉(zhuǎn)基因處理,但是是否成功還未知。圖1和2分別表示兩段DNA序列。表格中1-4分別表示4種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
.
(1)若A-C澆清水,D-F澆的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成長(zhǎng)的是_________。
(2)若要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株甲,在大腸桿菌培養(yǎng)基中還必須加入 ___________。
(3)假設(shè)位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列均如圖I所示,則應(yīng)選擇表中酶__________進(jìn)行酶切;若位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列分別如圖I和II所示,則應(yīng)選擇表中酶__________ 進(jìn)行酶切。
(4)假設(shè)大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側(cè)序列如圖II所示,請(qǐng)?jiān)诜娇騼?nèi)畫(huà)出經(jīng)酶切后產(chǎn)生的兩個(gè)末端的堿基序列。(2分)
(5)假設(shè)EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中,但植物F仍沒(méi)有表現(xiàn)出抗性,分析可能的原因_______________________________________________________________。
下圖甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000對(duì)堿基)與大腸桿菌pUC18質(zhì)粒(2.7kb)重組的示意圖。圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因,lacZ是顯色基因,其上的EcoRI識(shí)別位點(diǎn)位于目的基因插入位點(diǎn)的右側(cè),其控制合成的物質(zhì)能使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色。(圖乙中深色圓點(diǎn)即為藍(lán)色菌落)
(6)圖乙的培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素,請(qǐng)判斷圖乙中所出現(xiàn)的白色和藍(lán)色兩種菌落中,何種會(huì)含有重組質(zhì)粒。___________。
(7)現(xiàn)用EcoRI酶切質(zhì)粒,酶切后進(jìn)行電泳觀察,若出現(xiàn)長(zhǎng)度為_(kāi)________kb和 kb的片段,則可以判斷該質(zhì)粒已與目的基因重組成功。(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點(diǎn)與EcoRI的識(shí)別位點(diǎn)之間的堿基對(duì)忽略不計(jì))
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科目:高中生物 來(lái)源:河北省2009—2010學(xué)年度第二學(xué)期期中考試高二生物試卷 題型:綜合題
回答下列關(guān)于基因工程的問(wèn)題:
如圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖,所用載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因,質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后,其上的基因能得到表達(dá),根據(jù)圖示所給信息回答下列問(wèn)題:
(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時(shí),用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,露出相同的黏性末端,將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的 ,使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。
(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時(shí),效率還不高;導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌,實(shí)際上有的根本沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒;有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A;只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過(guò)如下步驟來(lái)鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒:
將得到的細(xì)菌涂抹在一個(gè)含有 的培養(yǎng)基上,能夠生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的,反之則沒(méi)有。此過(guò)程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個(gè)條件 ; 。
(3)若進(jìn)一步鑒定證明細(xì)菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒,將得到的細(xì)菌涂抹在一個(gè)含有
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),若細(xì)菌 ,則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來(lái)證明此過(guò)程,應(yīng)該用 作為探針。
(4)使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi),主要是借鑒 的途徑。
(5) 目的基因表達(dá)成功后,“工程菌”明顯不同于細(xì)菌D。從變異的來(lái)源看,此變異屬于
。導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么? 。
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科目:高中生物 來(lái)源:2010-2011學(xué)年上海市寶山區(qū)高三上學(xué)期期末考試生物試卷 題型:綜合題
回答下列關(guān)于基因工程的問(wèn)題
下圖1是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線,表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。
(1)若對(duì)圖2中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性如何變化,為什么?
(2)圖中將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒,可以只用EcoR I同時(shí)酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因,也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因,后一個(gè)方法的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 。
(3)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入 酶。重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。
(4)圖1過(guò)程①可采用的操作方法是 ,過(guò)程②可采用的生物技術(shù)是 。過(guò)程③可采用的生物技術(shù)是 。
(5)分別從分子水平簡(jiǎn)述雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過(guò)程是_______________。
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