Question

【題目】為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對抗生素耐藥性情況”某同學進行了如下實驗：

請分析回答下列問題：

（1）配制的細菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應加入適量的_______和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進行的操作是_______。

（2）接種微生物的方法有很多，圖中過程①②③所示的方法為_______________。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時，同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿，原因是_________________。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量（單位：個/ml），這里的n=_____________（4或5或6）。經(jīng)正確操作培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為150、158和157。據(jù)此可得出每毫升樣品中的活菌數(shù)_______（填“至多”或“至少”）為________個。

（3）請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環(huán)素耐藥性”的實驗操作步驟：

步驟1：分別取______________________________加入三組無菌培養(yǎng)皿中，再加入滅菌并冷卻到50°C左右的培養(yǎng)基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2：向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測的乳酸菌菌種。

步驟3：將接種后的三組培養(yǎng)基和一個________都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)一定時間，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長情況。

Answer 1

【答案】維生素 調(diào)pH 稀釋涂布平板法 分別計數(shù)3次取平均值，使實驗結(jié)果更加準確可靠 6 至少 1.55×108 等量的且適量的青霉素、四環(huán)素、無菌水 未接種的培養(yǎng)基

【解析】

分析圖解可知，圖示過程為微生物分離與純化過程中的稀釋涂布平板法，即將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）配制的細菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應加入適量的維生素和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要先調(diào)pH。

（2）接種微生物的方法有很多，圖1中過程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法，用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時，同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿，分別計數(shù)3次，取平均值，使實驗結(jié)果更加準確可靠。分析圖解可知，圖中酸奶樣品總共稀釋105倍，并且稀釋涂布平板時只取了0.1ml，因此這里的n=6。3個平板上的菌落數(shù)分別為：150、158和157，據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)至少為（150+158+157）÷3÷0.1×105=1.55×108個。

（3）步驟1：根據(jù)等量原則，應該分別取等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水加入三組無菌培養(yǎng)皿中。步驟3：根據(jù)對照原則，應該將接種后的三組培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天作為對照試驗。