Question

人的干擾素在臨床上需求量很大，通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對(duì)血液制品顧慮重重。如果應(yīng)用基因工程和克隆技術(shù)，將人的干擾素基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)人干擾素就成為可能。其大致過(guò)程如下：

Ⅰ.采集良種供體奶牛的卵母細(xì)胞和精液，通過(guò)體外受精，形成奶牛受精卵；

Ⅱ.將人干擾素基因?qū)�入奶牛受精卵，形成重組細(xì)胞；

Ⅲ.電脈沖刺激重組細(xì)胞促使其形成早期胚胎；

Ⅳ.將胚胎移植到受體母牛的子宮中，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)一般情況下，良種奶牛所產(chǎn)生的能用于體外受精的卵母細(xì)胞往往數(shù)量不足，請(qǐng)舉出一種可以獲得更多卵母細(xì)胞的方法：____________________________________________。

(2)步驟Ⅰ中，在體外受精前，需要對(duì)奶牛的精子進(jìn)行______________處理。受精時(shí)，往往一個(gè)卵母細(xì)胞只能和一個(gè)精子結(jié)合，受精過(guò)程中防止多精入卵的生理反應(yīng)包括________________反應(yīng)和卵黃膜封閉作用。

(3)步驟Ⅱ中，將人的干擾素基因?qū)�入奶牛受精卵最為有效的方法是___________________________。導(dǎo)入基因前，需要將干擾素基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，這一步驟屬于基因工程“四步曲”中的_____________________________________________，此步驟的目的是____________________________________________________________________________________________。

(4)實(shí)驗(yàn)步驟Ⅲ中，進(jìn)行動(dòng)物早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有各種有機(jī)鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分外，還要添加______________和動(dòng)物血清。

(5)實(shí)驗(yàn)步驟Ⅳ中，應(yīng)選擇性別為_(kāi)____________的奶牛胚胎進(jìn)行移植。請(qǐng)舉出一種人工控制或篩選胚胎性別的方法：____________________________________________________________。

(6)若需迅速得到大量轉(zhuǎn)基因奶牛，可采用以下兩種處理方法：

方法A：在步驟Ⅳ中將早期胚胎分離成若干個(gè)胚胎細(xì)胞，讓其分別發(fā)育成一頭小牛。進(jìn)行上述操作時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育至最佳時(shí)期的胚胎進(jìn)行操作，分割時(shí)必須注意要將早期胚胎中的______________均等分割。

方法B：在步驟Ⅳ中將早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞核移植到普通黃牛的______________細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成新胚胎。為獲得大量可供移植的胚胎細(xì)胞核，可將早期胚胎細(xì)胞分離出來(lái)，在添加了抑制因子的培養(yǎng)液中，將其培養(yǎng)成能夠增殖而不發(fā)生分化的________________細(xì)胞，再?gòu)脑摷?xì)胞中提取所需的細(xì)胞核。

上述兩種方法中，最能保持步驟Ⅳ中早期胚胎細(xì)胞遺傳特征的是方法______________。

 

Answer 1

(1)①用促性腺激素處理良種母牛(使其超數(shù)排卵)；②從屠宰場(chǎng)已屠宰母牛的卵巢中采集、培養(yǎng)(答其中之一即可，其他合理答案也可)

(2)獲能　透明帶

(3)顯微注射技術(shù)　基因表達(dá)載體的構(gòu)建　使人干擾素基因能夠在奶牛乳腺細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可遺傳給下一代，同時(shí)能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

(4)激素

(5)雌性�、賆精子與Y精子分離技術(shù)(選擇X型精子進(jìn)行體外受精)；②顯微鏡鏡檢法(利用顯微鏡觀察胚胎細(xì)胞性染色體確定胚胎性別)；③SRY－PCR胚胎的性別鑒定技術(shù)[利用SRY基因(Y染色體上的性別決定基因)作為探針，對(duì)胚胎細(xì)胞的DNA進(jìn)行檢測(cè)](答出一種即可)

(6)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　去核卵母　胚胎干　A