Question

為驗證某種中藥牙膏是否像其廣告宣傳的一樣具有較強的抑菌功效，老師帶領生物興趣小組的同學設計了如下實驗（符合無菌操作要求）。請分析上述實驗過程并回答下列問題：
①用無菌水漱口，向漱口液中加入適量的該中藥牙膏；
②配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基；
③將上述樣品接種到培養(yǎng)基上，在適宜條件下進行培養(yǎng)；
④一段時間后，對培養(yǎng)結果進行觀察并進行菌落計數。

（1）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、____；培養(yǎng)基在分裝前往往要進行____。

（2）本實驗樣品接種時最好采用____方法。培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基表面長出菌落，每一個標準菌落來源于樣品中的____。

（3）食品安全檢測時通常采用大腸桿菌作為致病微生物的指示菌，為測定哪些菌落屬于大腸桿菌，可選用____培養(yǎng)基對菌落進行鑒定，大腸桿菌的菌落在該培養(yǎng)基上呈現(xiàn)黑色。

（4）請指出本實驗設計中的一個明顯的錯誤：____，請加以改正：____。

（5）如何證明所用培養(yǎng)基已經徹底滅菌？____。

Answer 1

（1）倒平板 高壓蒸汽滅菌

（2）稀釋涂布平板法 一個活菌

（3）伊紅美藍

（4）沒有設置對照實驗； 應將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏分別接種培養(yǎng)

（5）對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底

本題考查微生物培養(yǎng)技術，制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌，接種的方法一般有平板畫線法和觀察菌落時，一般用稀釋涂布平板法，一個標準菌落是由一個細菌產生的。對大腸桿菌的鑒定一般采用伊紅美藍鑒別培養(yǎng)基進行，就設置對照實驗，應將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏分別接種培養(yǎng)，還要對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底。