Question

利用動(dòng)物乳腺生產(chǎn)產(chǎn)品的技術(shù)稱為動(dòng)物乳腺反應(yīng)器技術(shù)。2005年山東省青島“嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的研制”項(xiàng)目通過(guò)鑒定，該項(xiàng)目生產(chǎn)的藥用蛋白具有表達(dá)效率高、成本低、安全性高、易于分離純化的優(yōu)點(diǎn)，可產(chǎn)生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等醫(yī)藥產(chǎn)品，造福人類健康。下圖為利用生物技術(shù)獲得生物這一新品種和抗蟲棉的過(guò)程，據(jù)圖回答：

⑴在基因工程中，A表示             ，如果直接從蘇云金桿菌中獲得抗蟲基因，①過(guò)程使用的酶區(qū)別于其他酶的特點(diǎn)                                                                                    
                                                                                                                                  。
　　⑵在研究過(guò)程中，研究人員首先從相關(guān)基因組中獲取了目的基因，并采用             技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行了擴(kuò)增，然后將目的基因與質(zhì)粒等載體組合形成了重組載體。在重組載體的構(gòu)建過(guò)程中需要的工具酶有                                   、                                  。
⑶基因工程的四個(gè)基本操作步驟是目的基因的獲取、                              、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞和                             。若要獲得的轉(zhuǎn)基因山羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種山羊                及其啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、                          和復(fù)制原點(diǎn)等。
⑷將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程中，在③過(guò)程中一般是采用                           方法，但我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)了                        獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，在②過(guò)程中一般采用               方法，受體細(xì)胞一般是                 。
⑸由于轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物存在于山羊的乳汁中，檢測(cè)其體內(nèi)是否出現(xiàn)藥用蛋白，在分子水平上的檢測(cè)方法及結(jié)果是什么?
檢測(cè)方法是：從轉(zhuǎn)基因山羊的乳汁中提取              ，用                                            ；
預(yù)測(cè)結(jié)果是：如果出現(xiàn)雜交帶，表明                                                                        。
　　⑹要確定目的的基因（抗蟲基因）導(dǎo)入棉花細(xì)胞后，是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá)，需進(jìn)行檢測(cè)和鑒定工作，請(qǐng)寫出在個(gè)體水平上的鑒定過(guò)程：                                                          。
(7)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是_____________       
                                                                                                                                 。（2分）

Answer 1

⑴目的基因   一種限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開（或一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并且在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子 ）（2分）  ⑵ PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） 限制酶  DNA連接酶   ⑶基因表達(dá)載體的構(gòu)建   目的基因的檢測(cè)與鑒定  乳腺分泌蛋白基因    人抗凝血酶Ⅲ基因
⑷農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法   花粉管通道法  顯微注射技術(shù)  受精卵 ⑸蛋白質(zhì)  相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交    山羊的乳汁中出現(xiàn)了藥用蛋白      ⑹讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子，觀察害蟲的存活情況，以確定其是否具有抗蟲性狀。（7）使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用（2分）

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