Question

【題目】大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細(xì)菌，是一種常用的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)材料，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。

（1）下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。

根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于__________（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細(xì)菌需將培養(yǎng)基中__________換成__________，若要鑒定分解尿素的細(xì)菌還需將伊紅·美藍(lán)換成__________。

（2）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，常用的接種方法是____________________。

（3）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前通常需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是。對已使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過______________________處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

（4）現(xiàn)有一升水樣，用無菌吸管吸取1 mL水樣至盛有9 mL無菌水的試管中，依次稀釋103稀釋度。各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為________。

（5）為檢測嚴(yán)重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)，其原理是____________________________。

Answer 1

【答案】 鑒別 蛋白胨 尿素 酚紅指示劑 平板劃線法和稀釋涂布平板法 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 滅菌 5.6×108 黑色 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌

【解析】【試題分析】

本題考查的培養(yǎng)、分離計(jì)數(shù)的相關(guān)知識，比較容易作答。需要考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，并把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，在梳理所學(xué)知識的同時(shí)結(jié)合題意分析作答。第（4）小題需要用到公式：單位樣品中的菌落數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL）M代表稀釋的倍數(shù)。據(jù)此答題。

（1）伊紅美藍(lán)是鑒定大腸桿菌的試劑，因此該培養(yǎng)基從用途上屬于鑒別培養(yǎng)基；若要分離能分解尿素的細(xì)菌，則需要保證培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源，即將蛋白胨換成尿素；鑒定分解尿素的細(xì)菌，需要使用酚紅指示劑，即需將伊紅·美藍(lán)換成酚紅指示劑。

（2）培養(yǎng)微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（3）在接種前檢測固體培養(yǎng)基是否被污染，通常采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生；對已使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

（4）題中稀釋的倍數(shù)是103，三個菌落的平均數(shù)=（55+56+57）÷3=56個，圖中則每毫升樣品中菌株數(shù)=56÷0.1×103=5.6×105個，所以每升土壤浸出液中的菌株數(shù)=5.6×105×103=5.6×108個。

（5）由題意可知，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色，所以檢測大腸桿菌數(shù)量時(shí)，在平板培養(yǎng)基中應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)；通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)的原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。