Question

【題目】臨床上對(duì)胰島素需求量很大。如圖是利用奶牛乳腺生物反應(yīng)器制備胰島素的流程圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，為避免人胰島素基因末端發(fā)生任意連接和載體的自身環(huán)化，應(yīng)選用_________酶處理目的基因和載體。要使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異性表達(dá)，應(yīng)將人胰島素基因與__________________等調(diào)控組件重組在一起。

（2）②過(guò)程采集的奶牛精子常用__________________法使其獲能，與成熟的卵子在專用受精溶液中完成受精。受精過(guò)程中，在精子觸及_________的瞬間會(huì)產(chǎn)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精入卵受精的第一道屏障。

（3）對(duì)移植前的胚胎需進(jìn)行性別鑒定，一般采用SRY-PCR。SRY-PCR法基本程序是：從被測(cè)的囊胚中取出幾個(gè)_______________（填“滋養(yǎng)層”或“內(nèi)細(xì)胞團(tuán)”）細(xì)胞，提取DNA；經(jīng)PCR反應(yīng)體系擴(kuò)增SRY基因（Y染色體上特有的性別決定基因）片段，然后對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)。要大量獲得SRY基因，PCR擴(kuò)增時(shí)需要加入兩種引物：_________（選填“引物Ⅰ”、“引物Ⅱ”、“引物Ⅲ”、“引物Ⅳ”），原因是DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的_____________（選填“5’端”或“3’端”）開始延伸DNA鏈。

（4）為了使胚胎移植能成功，需要對(duì)代孕奶牛C進(jìn)行___________________處理，使之與供體的生理狀況保持相同。為了提高胚胎利用率，胚胎移植前可對(duì)胚胎進(jìn)行_____________________處理。

（5）關(guān)于克隆人技術(shù)在科學(xué)界引起了激烈的爭(zhēng)論，中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人。重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)，但是，中國(guó)不反對(duì)性克隆_______。

Answer 1

【答案】PstⅠ、SmaⅠ 奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子 化學(xué)誘導(dǎo) 卵細(xì)胞膜 滋養(yǎng)層 引物Ⅰ和引物Ⅳ 3’端 同期發(fā)情 胚胎分割 治療

【解析】

基因工程的操作步驟：目的基因的獲��；構(gòu)建基因表達(dá)載體；把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)和鑒定。
胚胎移植：指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，為避免人胰島素基因末端發(fā)生任意連接和載體的自身環(huán)化，應(yīng)該選擇不同的限制酶進(jìn)行切割，AhaⅠ會(huì)破壞目的基因，故不能用AhaⅠ切割，又因?yàn)橘|(zhì)粒沒(méi)有PaⅠ酶的識(shí)別序列，目的基因上無(wú)HindⅢ的識(shí)別序列，故應(yīng)選用PstⅠ、SmaⅠ酶處理目的基因和載體。要使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異性表達(dá)，應(yīng)將人胰島素基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起，可以從轉(zhuǎn)基因奶牛的乳汁中提取胰島素。
（2）②過(guò)程采集的奶牛精子常用化學(xué)誘導(dǎo)法處理使其獲能，與成熟的卵子在專用受精溶液中完成受精。受精過(guò)程中，在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間會(huì)產(chǎn)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精入卵受精的第一道屏障，精子入卵的第二道屏障是卵細(xì)胞膜反應(yīng)。
（3）應(yīng)該選擇滋養(yǎng)層細(xì)胞，提取DNA進(jìn)行性別鑒定。由于DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的3’端開始延伸DNA鏈，故應(yīng)該選擇引物I和引物IV進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

（4）為了使胚胎移植能成功，需要對(duì)代孕奶牛C進(jìn)行同期發(fā)情處理，使之與供體的生理狀況保持相同。為了提高胚胎利用率，胚胎移植前可對(duì)胚胎進(jìn)行胚胎分割處理，這樣可以獲得同卵雙胎或多胎。

（5）關(guān)于克隆人技術(shù)在科學(xué)界引起了激烈的爭(zhēng)論，中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人。重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)，但是，中國(guó)不反對(duì)治療性克隆。