PCR技術(shù)是將某一特定DNA片段在體外酶的作用下，在高溫環(huán)境中復(fù)制出許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地擴增任何要求的目的基因或DNA分子片段。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。

表1

PCR反應(yīng)體系

50 μL

緩沖液

5 μL

脫氧核苷酸

1 μL

引物A

0.5 μL

引物B

0.5 μL

DNA聚合酶

0.5 μL

模板DNA　　

1～2 μL

加去離子水補足至50 μL

 

　　　　　　　表2

反應(yīng)條件

溫度

時間

變性

95 ℃

30 s

復(fù)性

55 ℃

30 s

延伸

72 ℃

1 min

30個循環(huán)后

適宜

5～10 min

保溫

4 ℃

2 h

 

(1)PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)____________的過程。從上表中可得出，PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較，主要區(qū)別之一是_____________________________________。此外，從反應(yīng)條件看，所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有________的特點。

(2)PCR擴增過程中對DNA片段進(jìn)行高溫加熱處理，其目的是____________________________________，其作用相當(dāng)于細(xì)胞內(nèi)________酶的作用。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是________________________________________。

(3)下圖為第1輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴增的產(chǎn)物。

　

 

(1)DNA復(fù)制　不需要ATP(或需要加入引物或不需要解旋酶)　耐高溫

(2)使DNA雙鏈解開成為單鏈　解旋　DNA聚合酶只能從引物的3’端延伸DNA鏈

(3)

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

DNA親子鑒定測試原理是：從被測試者的血液或口腔黏膜細(xì)胞或者培育的組織內(nèi)提取DNA，用限制性內(nèi)切酶將DNA樣本切成特定的小片段，放進(jìn)凝膠內(nèi)，用電泳推動DNA小片段分離，再使用特別的“探針”去尋找基因。相同的基因會聚集在一起，然后用特別的染料在X光下，便會顯示由DNA探針凝聚于一起的黑色條碼；每個人的條碼的一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親的條碼吻合。請回答：

⑴下列有關(guān)限制性內(nèi)切酶的敘述中錯誤的是（    ）

A． 有高效性                         B．一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列

C．主要存在于某些微生物體內(nèi)          D．限制酶主要破壞堿基對之間的氫鍵聯(lián)系

⑵“探針”的化學(xué)本質(zhì)是 （   ）

A． 某一個完整DNA                      B．含目的基因的特定DNA片段

C．由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)分子      D．與目的基因互補的特定單鏈DNA

⑶條碼一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親的條碼吻合。為什么？              

                                                        。

⑷樣品DNA經(jīng)PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）擴增，可以獲得大量DNA分子克隆。其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA人工復(fù)制（如下圖）。PCR技術(shù)中運用到的酶與人體中


的酶相比具有的特點是           。PCR技術(shù)有何明顯優(yōu)點                    

                              

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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

（8分） DNA親子鑒定測試原理是：從被測試者的血滴或口腔黏膜細(xì)胞或者培育的組織內(nèi)提取DNA，用限制性內(nèi)切酶將DNA樣本切成特定的小片段，放進(jìn)凝膠內(nèi)，用電泳推動DNA小片段分離，再使用特別的“探針”去尋找基因。相同的基因會凝聚在一起，然后利用特別的染料在X光下，便會顯示由DNA探針凝聚于一起的黑色條碼。每個人的條碼一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親的條碼吻合。反復(fù)幾次過程，每一種探針用于尋找DNA的不同部位并形成獨特的條碼，便可得到超過99.9％的分辨概率。 請回答：

（1）限制性內(nèi)切酶能將DNA樣品切成特定的小片段，這主要體現(xiàn)了酶的  

  A．專一性    B．高效性       C．多樣性       D．作用條件溫和

（2）“探針”是指                                                    

  A．某一個完整的目的基因                  B．目的基因片段的特定DNA

  C．與目的基因相同的特定雙鏈DNA           D．與目的基因互補的特定單鏈DNA

（3）條碼一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親的條碼吻合。為什么?

                                                                               

（4）樣品DNA經(jīng)PCR技術(shù)擴增，可以獲取大量DNA分子。該技術(shù)是在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在很短的時間內(nèi)，將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍，使實驗室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活動的生物體。

①圖中A過程相當(dāng)于生物體內(nèi)的            過程。

②某樣品DNA中共含300個堿基對，堿基數(shù)量滿足：(A+T)：(G+C)=1/2，現(xiàn)欲得到100個與樣品相同的DNA，至少需要向試管中加入               個腺嘌呤脫氧核苷酸。

③A過程也稱為DNA的變性，此過程在溫度高達(dá)90～95℃時才能完成，說明DNA分子具有一定的           性。

④由圖中信息分析可知，催化C過程的酶是                 ，它與正常細(xì)胞里的酶區(qū)別是                  。

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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

樣品DNA經(jīng)PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴增，可以克隆出大量DNA分子。其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如下圖)。PCR技術(shù)可在很短的時間內(nèi)，將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍，使實驗室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。請回答：

(1)圖中A過程表示______________________________________________，在活細(xì)胞內(nèi)該過程可由__________酶作用來完成，兩過程均是破壞了DNA分子雙鏈間的__________鍵。

(2)某樣品DNA中共含有3000個堿基對，堿基數(shù)量滿足(A＋T)∶(G＋C)＝1∶2，現(xiàn)在要得到1000個拷貝(即與樣本相同的DNA)，至少要向試管中加入___________________個腺嘌呤脫氧核苷酸。

(3)由于子代的染色體一半來自父方，一半來自母方，因此可以利用STR?PCR技術(shù)進(jìn)行親子鑒定，其原理是：首先獲取被測試者的DNA中的相關(guān)STR(短串聯(lián)重復(fù)序列)，并進(jìn)行PCR擴增，取其中一樣本用限制性內(nèi)切酶切割成特定的DNA小片段，放進(jìn)凝膠內(nèi)，進(jìn)行電泳使DNA小片段分離，再使用特別的“探針”去尋找有關(guān)的STR。相同的STR會聚集在一起，然后利用特別的染料，在X光下便會顯示黑色條帶。每個人的條帶一半與其母親的條帶吻合，另一半與其父親的條帶吻合。

①限制性內(nèi)切酶能將DNA樣品切割成特定的小片段，這主要體現(xiàn)了酶的________。

A．專一性　　　 B．高效性　　 C．多樣性　　　 D．作用條件溫和

②雙胞胎或多胞胎的“基因身份證明”是否一定完全相同？________________，原因是____________________________________________________________________________。

③下圖為某小孩和其母親以及待測定的四位男性的DNA指紋圖譜示意圖，請推測該小孩的父親是__________________。

 

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