Question

【題目】閱讀以下資料，回答相關(guān)問(wèn)題。

資料1：小鼠制備的抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕試劑盒”，檢測(cè)早孕的準(zhǔn)確率在90%以上。

資料2：葡萄糖異構(gòu)酶在工業(yè)上應(yīng)用廣泛，為提高其熱穩(wěn)定性，朱國(guó)萍等人在確定第138位甘氨酸為目標(biāo)氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，結(jié)果其最適反應(yīng)溫度提高了10—12℃，使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)更具剛性。

資料3：巴西是全球最大的甘蔗生產(chǎn)國(guó)，但是甘蔗易受螟蟲(chóng)的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因甘蔗已培育成功，并且批準(zhǔn)該品種進(jìn)入市場(chǎng)。

資料4：大腸埃希菌，俗稱(chēng)大腸桿菌。是人和動(dòng)物腸道中的正常棲居菌。自來(lái)水一旦被它污染，就有可能引發(fā)腸道傳染病，甚至流行病。因此，必須對(duì)自來(lái)水進(jìn)行嚴(yán)格的檢測(cè)，以確保飲水安全。我國(guó)規(guī)定1000ml自來(lái)水中的大腸桿菌數(shù)不得超過(guò)3個(gè)。

（1）資料1中，在該“單抗”的生產(chǎn)過(guò)程中，將______________作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行接種后，從脾臟中提取B淋巴細(xì)胞，并設(shè)法將其與鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，選出融合的雜種細(xì)胞，對(duì)該細(xì)胞還需進(jìn)行____________________，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的____________。單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)有_________________。

（2）資料2中提到的生物技術(shù)屬于____工程的范疇。在該實(shí)例中，直接需要操作的____________（選填“肽鏈結(jié)構(gòu)”、“蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)”、“基因結(jié)構(gòu)”）。

（3）資料3中獲得轉(zhuǎn)基因甘蔗的過(guò)程中，核心步驟是________________________，為了避免目的基因和運(yùn)載體的自身連接成環(huán)和反向連接，應(yīng)該采取的措施是用____________________對(duì)目的基因和載體分別進(jìn)行切割。

（4）實(shí)驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。將漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進(jìn)行_________________滅菌。培養(yǎng)基進(jìn)行_______________滅菌。為了鑒定大腸桿菌，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入_______________________。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)_________________色。

Answer 1

【答案】人絨毛膜促性腺激素 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè) 雜交瘤細(xì)胞 特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備 蛋白質(zhì) 基因結(jié)構(gòu) 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的（不同）限制酶 干熱 高壓蒸汽 伊紅—美藍(lán) 黑

【解析】

1、單克隆抗體的制備過(guò)程的細(xì)節(jié)：

（1）二次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；

②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。

（2）細(xì)胞來(lái)源：B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無(wú)限繁殖；

骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體，體外能無(wú)限繁殖。

（3）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。

（4）提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。

2、單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，能大量制備。

3、基因工程的基本操作程序

第一步：目的基因的獲��；

第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建；

第三步：將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；

第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)。

（1）資料1中，在該“單抗”的生產(chǎn)過(guò)程中，將人絨毛膜促性腺激素作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行接種后，從脾臟中提取B淋巴細(xì)胞，并設(shè)法將其與鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，選出融合的雜種細(xì)胞，對(duì)該細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的雜交瘤細(xì)胞。單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備。

（2）資料2是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，使之符合人類(lèi)需求，屬于蛋白質(zhì)工程，其原理是通過(guò)改造基因來(lái)獲得相應(yīng)功能的蛋白質(zhì)。

（3）基因工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是構(gòu)建基因表達(dá)載體，為了避免目的基因和運(yùn)載體的自身連接成環(huán)和反向連接，應(yīng)該采取的措施是使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的（不同）限制酶對(duì)目的基因和運(yùn)載體分別進(jìn)行切割。

（4）微生物培養(yǎng)過(guò)程中要注意防止雜菌污染，培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進(jìn)行干熱或高壓蒸汽滅菌，為了鑒定大腸桿菌，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入伊紅——美藍(lán)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色。