Question

【題目】回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：

（1）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面________時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的________。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是________。要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用酶處理，可用的酶是________。

（2）隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)________的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成________細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性________，細(xì)胞膜表面糖蛋白的量________。

（3）現(xiàn)用某種大分子染料，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是________。

Answer 1

【答案】相互接觸 接觸抑制 單層（或一層） 胰蛋白酶 衰老甚至死亡 不死性 降低 減少 活細(xì)胞的膜具有選擇透過(guò)性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色

【解析】

在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出接觸抑制現(xiàn)象，此時(shí)是單層細(xì)胞。用胰蛋白酶可以使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離開(kāi)來(lái)。隨著細(xì)胞傳代培養(yǎng)代數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)改變而變成不死性細(xì)胞。由于活細(xì)胞的膜具選擇透過(guò)性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，而死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失選擇透過(guò)性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色。

（1）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，由于細(xì)胞有接觸抑制的特性，故當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增增殖。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是單層（或一層）。若要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，通常需要用胰蛋白酶處理，使其分散成單細(xì)胞懸液。

（2）隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，并出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象；但有極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成不死性細(xì)胞，即相關(guān)基因發(fā)生基因突變成為癌細(xì)胞，該種細(xì)胞的細(xì)胞膜表面糖蛋白的量減少，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞間黏著性降低，

（3）為了鑒別細(xì)胞的死活，可用某種大分子染料，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，由于細(xì)胞膜具有選擇透過(guò)性，故可根據(jù)細(xì)胞是否被染色來(lái)加以鑒別，通常死細(xì)胞由于細(xì)胞膜失去選擇透過(guò)性而被染色，而活細(xì)胞因?yàn)榧?xì)胞膜的選擇透過(guò)性使得大分子染色劑無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞中而不被染色。