Question

(11分)．日本下村修、美國(guó)沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖。據(jù)圖回答：

(1)綠色熒光蛋白基因在該實(shí)驗(yàn)中是作為________基因。獲取綠色熒光蛋白基因常用的三種方法是____________­­__________________________。

圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC—，請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________。

(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是________________________________。

(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是______________________________。

(4)目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________。

①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白

(5)在培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和________等。

(6)以上培育過程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有__________________等。(至少答出三項(xiàng))                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                             

 

Answer 1

【答案】

⑴目的 

從基因文庫(kù)中獲取目的基因、人工合成、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（答全得2分）

 （2分）

(2)顯微注射技術(shù)　(3)為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因　(4)②①③④　

(5)血清、血漿　

(6)轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)(至少答出三項(xiàng))（2分）

【解析】由圖可知綠色熒光蛋白基因是目的基因。獲取目的基因方法：從基因文庫(kù)中獲取目的基因、人工合成、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。動(dòng)物轉(zhuǎn)基因一般采用顯微注射技術(shù)，重組質(zhì)粒中目的基因的作用為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因。