Question

【題目】2018年10月1日諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予詹姆斯·艾利森和本庶佑兩位科學(xué)家，以表彰他們?cè)诎┌Y免疫治療方面作出的貢獻(xiàn)。他們研發(fā)的PD-1單克隆抗體藥物，已被證實(shí)在對(duì)抗癌（腫瘤）方面具有突出效果�；卮鹣铝袉栴}：

（1）制備PD-1單克隆抗體藥物的過程，要用到_____________和動(dòng)物細(xì)胞融合兩項(xiàng)技術(shù)，請(qǐng)寫出其它動(dòng)植物細(xì)胞工程技術(shù)的名稱__________________。要選用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，原因是__________________________。

（2）制備過程中，需用特定的_____________培養(yǎng)基對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行篩選：?jiǎn)慰寺】贵w具有__________________________的特點(diǎn)。

（3）本庶佑研究發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞表面的PD-1蛋白對(duì)T細(xì)胞有“剎車作用”：人體組織細(xì)胞表面少量的PD-L1蛋白質(zhì)（癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞表面有大量PD-L1蛋白），與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白質(zhì)結(jié)合后，使T細(xì)胞凋亡，避免過度免疫，即“剎車作用”（癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞也由此躲過細(xì)胞免疫），如圖1所示。針對(duì)此發(fā)現(xiàn)，科學(xué)家研發(fā)了治療癌癥的新藥物PD-1單克隆抗體，它的作用原理如圖2所示。

由此可知，PD-1單克隆抗體通過____________________________抑制癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞。你認(rèn)為有器官移植史的癌癥患者能夠用PD-1單克隆抗體進(jìn)行治療嗎？請(qǐng)說明理由。___________，____________________________。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)（或克隆技術(shù)）、植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù) B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外增殖；骨髓瘤細(xì)胞能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體 選擇 特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備 與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白特異性結(jié)合，T細(xì)胞不會(huì)裂解凋亡，再通過T細(xì)胞參與的細(xì)胞免疫清除癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞 不能 會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫排斥反應(yīng)

【解析】

1、單克隆抗體的制備

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

2、T細(xì)胞表面的PD-1蛋白對(duì)T細(xì)胞有“剎車作用”，可以抑制人體的免疫反應(yīng)。

（1）制備單克隆抗體的過程，要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合兩項(xiàng)技術(shù)，其它動(dòng)、植物細(xì)胞工程技術(shù)還有：動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)（或克隆技術(shù)）、植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。要選用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，原因是：B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外增殖；骨髓瘤細(xì)胞能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。

（2）要想得到能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞，需用特定的選擇性培養(yǎng)基對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行篩選；因此制備過程中，需用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行篩選：?jiǎn)慰寺】贵w具有的特點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。

（3）根據(jù)圖2所示的作用原理，PD-1單克隆抗體通過與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白特異性結(jié)合，T細(xì)胞不會(huì)裂解凋亡，再通過T細(xì)胞參與的細(xì)胞免疫清除癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞；有器官移植史的癌癥患者不能用PD-1單克隆抗體進(jìn)行治療，原因是T細(xì)胞不會(huì)裂解死亡，會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫排斥反應(yīng)。