Question

【題目】反芻動(dòng)物如牛和山羊，具有特殊的器官一瘤胃，瘤胃中生活著多種微生物，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究，請(qǐng)回答：

（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是_____（多選）。

A.酒精燈 B.培養(yǎng)皿 C.顯微鏡 D.無菌水 E.接種環(huán)

（2） 向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí) ， 若試管口粘附有培養(yǎng)基 ， 需要用酒精棉球擦凈的原因是_____。

（3）剛果紅可與 _____形成紅色復(fù)合物，研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落(見圖 1）。圖中降解圈大小與纖維素酶的_____有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是_____（填圖中序號(hào)）。

（4）纖維素酶高產(chǎn)菌株在-20℃長期保存時(shí)，菌液中常需加入一定量的_____ 保藏。

（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株 A 和 B，在不同溫度和 pH 條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見圖 2，推測(cè)菌株_____ 更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是_____。

Answer 1

【答案】 CE 避免培養(yǎng)基污染棉塞 纖維素 量與活性菌 2 甘油 B 發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸， B 菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高

【解析】試題分析：微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作。篩選纖維素分解菌的原理是剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

（1）在樣品稀釋中需要使用無菌水稀釋；在涂布平板操作中，需要使用酒精燈對(duì)涂布器進(jìn)行滅菌，并在酒精燈旁完成對(duì)培養(yǎng)皿涂布接種操作，所以從選項(xiàng)分析可知，顯微鏡和接種環(huán)不需要，故選CE。

（2）分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈以避免培養(yǎng)基污染棉塞。

（3）根據(jù)“剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌”，所以在剛果紅培養(yǎng)基平板上，可以篩選到有透明降解圈的菌落，降解圈大小與纖維素酶的多少和活性有關(guān)。纖維素酶的量越多，活性越強(qiáng)，分解的纖維素越多，透明降解圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是2。

（4）在-20℃長期保存菌株時(shí)，菌液中常需加入一定量的甘油保藏。

（5）由于胃部PH值較低，根據(jù)題意和圖示分析可知，發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，B菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，所以推測(cè)菌株B更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。