(1)稀釋菌原液：為確定合適的稀釋倍數(shù)，小組成員取1 mL菌原液進行如下圖所示的操作，在統(tǒng)計菌落時，發(fā)現(xiàn)平板上的平均菌落數(shù)為40個，則每毫升菌原液中的細菌數(shù)大約為________個。

(2)培養(yǎng)基的準備：在對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌的過程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當時間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，________，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，才可以取出滅菌的培養(yǎng)基等物品。待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時倒平板，在培養(yǎng)基凝固之前加入滅菌的剛果紅，從功能上來看，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中碳源主要是________�！�

(3)接種與觀察：在無菌條件下，用________取0.1 mL稀釋后的菌懸液進行圖1中________所示的操作，室溫放置2～3分鐘后倒置于恒溫箱中培養(yǎng)，室溫放置2～3分鐘的目的是__________________。培養(yǎng)過程中定期觀察菌落特征和透明圈的大小，圖2中D/d的值越________，表示該菌對纖維素分解能力越強。

（1）以Bt毒蛋白為有效成分的農(nóng)藥長期使用，會導致害蟲種群____，使藥效減弱直至喪失，無法在生產(chǎn)中繼續(xù)使用。

（2）以家蠶為材料，研究昆蟲抗藥性遺傳特性。測定生命力大致相同的多品種家蠶幼蟲致死50%的Bt濃度（LC50），結(jié)果如下：

1研究人員欲選擇敏感型和抗藥型家蠶為親本進行雜交實驗，據(jù)上表結(jié)果，最好選擇家蠶品種是_______________。

②雜交實驗及結(jié)果如下表：

實驗一和實驗二的結(jié)果表明，家蠶抗藥型是由位于____________染色體上的____性基因控制的；實驗____的結(jié)果表明，F1產(chǎn)生兩種配子且比例為1：1

（3）Bt毒蛋白與家蠶幼蟲的中腸細胞特異性受體結(jié)合，使細胞膜穿孔，細胞裂解，幼蟲死亡。為從分子水平上闡明家蠶產(chǎn)生抗藥性的原因，研究人員從實驗一親本________________細胞中提取總RNA，獲取cDNA，測定親本受體基因堿基序列如圖。

從分子水平推測家蠶抗藥性產(chǎn)生的原是敏感型受體基因中插入3個堿基對，導致____（填寫變異類型），進而在受體蛋白中插入一個氨基酸（酪氨酸），受體蛋白結(jié)構(gòu)改變，使受體不能與Bt毒蛋白結(jié)合而產(chǎn)生抗藥性。

（4）依據(jù)Bt受體基因設計的靶向sgRNA，可以與限制酶Cas9結(jié)合，定點切除受體基因的39個核苷酸。sgRNA和Cas9mRNA的混合物注射到____型家蠶受精卵中，若其發(fā)育成的家蠶幼蟲表現(xiàn)為________，則進一步證明上述推測成立。

（5）基因編輯技術能精確靶向修飾生物體基因組特定位點，人為改造生物體的遺傳信息。請從利或弊某一方面說明該技術的應用是一把“雙刃劍”： ____。

A.當體溫低于正常值時，正常人體冷敏神經(jīng)元的放電頻率一定高于熱敏神經(jīng)元的放電頻率

B.當人體處于寒冷環(huán)境時，通過神經(jīng)--體液調(diào)節(jié)，減少散熱、增加產(chǎn)熱，使體溫恢復至正常

C.若人體感染流感病毒后體溫持續(xù)偏高，點 S 將右移

D.正常人體處于炎熱環(huán)境中的散熱量大于在寒冷環(huán)境的中散熱量

（1）在進行細胞培養(yǎng)之前，要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織進行分離，形成單個細胞，這 一過程中需要利用_____酶處理，不能用纖維素酶與果膠酶的原因是_________________。

（2）形成重組細胞時應選用_________期的卵母細胞，去掉其細胞核的原因是____________。

（3）如果重組細胞為貼附性細胞，則在進行原代培養(yǎng)時，會表現(xiàn)出_____和_____等 特 點 。

（4）重組細胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會生出與供體奶牛遺傳性狀大致相同的犢牛，但某些性狀上也會有差異，原因是__________________________________；__________________________________。

（5）上圖中所示的生物技術整體被稱為_____。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動物_____具有全能性。

（1）在生物體內(nèi)，抗體是由________細胞分泌的，該細胞可以來自____________增殖分化。

（2）傳統(tǒng)方法獲取抗體時，需要將相應的抗原反復注射到動物體內(nèi)，從動物的血清中分離。顯然，這種方法產(chǎn)生的抗體量和純度等都很低特異性差，單克隆抗體的出現(xiàn)，克服了傳統(tǒng)抗體的不足，單克隆抗體是指________________。

（3）天然的抗體左右兩個V區(qū)結(jié)構(gòu)完全相同，只能結(jié)合相同的抗原。通過一定技術手段可以得到雙功能抗體(又叫雙特異性抗體)，它的兩個V區(qū)能結(jié)合不同的抗原。制備雙功能抗體的基本方法如下：將能分泌抗體1的雜交瘤細胞(A細胞)與能分泌抗體2的淋巴細胞(B細胞)進行融合，形成可分泌兩種親代抗體和雜種抗體的雜種—雜交瘤細胞(A—B)。細胞融合時需要用_______________、聚乙二醇或電激等誘導，融合后總共應該有______________種細胞(最多考慮兩兩融合)。

（4）雙功能抗體在癌癥治療中可作為“生物導彈”：用其中一個V區(qū)識別癌細胞表面_________，用另一個V區(qū)將T細胞等殺傷細胞定向帶到癌細胞所在的位置，這里，T細胞對癌細胞的攻擊屬于____免疫。

（5）細胞融合方法得到的雙功能抗體，只是將兩個不同抗體的V區(qū)集中到了一個抗體上，人們無法改變V區(qū)的結(jié)構(gòu)。通過____技術，可以對雙功能抗體的V區(qū)進行設計改造，使其更適合人類的需要。這種改造，最終還必須通過對DNA分子的改造來完成。

（1）步驟①中，在核移植前應去除卵母細胞的_____。小鼠體細胞體外培養(yǎng)時， 所需氣體主要是 O2 和 CO2，其中 CO2 的作用是維持培養(yǎng)液（基）的_____。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到_________期時，可從其內(nèi)細胞團分離出 ES 細胞。體外培養(yǎng)條件下，ES 細胞在_____細胞上，能夠維持只增殖不分化的狀態(tài)。

（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有 Rag2 基因的表達載體。可以根據(jù) Rag2 基因的__________設計引物，利用 PCR 技術擴增 Rag2 基因片段。PCR 過程需要經(jīng)過多次循環(huán)，每一個循環(huán)包括：加熱變性→冷卻復性→_____，其中冷卻復性的目的_________。用 HindⅢ和 PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進行酶切獲得 Rag2 基因片段。為將該片段 直接連接到表達載體，所選擇的表達載體上應具有_____酶的酶切位點。

（4）為檢測 Rag2 基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的_____，用_______________的抗體進行雜交實驗。

（1）根據(jù)圖甲分析，要獲得最大持續(xù)捕撈量，捕撈后大黃魚種群數(shù)量應處于__________點。用標志重捕法調(diào)查大黃魚種群密度時，若標記個體更易于被捕食，則種群密度的估計值__________（填“偏高”“偏低”或“不變”）。

（2）海洋魚類生活在不同的水層，這體現(xiàn)了生物群落的________結(jié)構(gòu)。新建碼頭的樁柱表面很快被細菌附著，隨后依次出現(xiàn)硅藻、藤壺、牡牡蠣等，該過程稱為_____________。

（3）圖乙表示某海域能量流動簡圖，A、B、C、D表示生態(tài)系統(tǒng)的組成成分。圖中________和_________（填字母）在碳循環(huán)過程中起著關鍵作用；能量在第一營養(yǎng)級和第二營養(yǎng)級之間的傳遞效率為___________。

（4）海洋會受到石油、工業(yè)廢水、生活污水等污染。如果污染超過海洋生態(tài)系統(tǒng)的________________，海洋生態(tài)系統(tǒng)就很難恢復到原來的狀態(tài)。

（1）啟動子的基本組成單位是____，終止子的功能是______________________。

（2）過程①的場所是____，過程①和過程②是____（同時/先后）進行的。

（3）圖示表明，當細胞中缺乏足夠的rRNA分子時，核糖體蛋白RP1能與mRNA分子上的RBS位點結(jié)合，從而導致mRNA____________________，終止核糖體蛋白的合成。這種調(diào)節(jié)機制既能保證細胞內(nèi)rRNA與核糖體在數(shù)量上的平衡，又可以____________________。

（4）大豆中的一種成分——染料木黃酮因能抑制rRNA形成而成為抗癌藥物的成分，試結(jié)合題中信息，分析染料木黃酮抗癌的機理：

①該物質(zhì)（染料木黃酮）可以抑制____的形成；

②____，進而降低蛋白質(zhì)合成速率，抑制癌細胞的生長、增殖。

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應具備的基本條件有_____（答出兩點即可），而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。

（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細胞中，_________ 的細胞是不能區(qū)分的，其原因是二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長；并且含有______________的細胞也是不能區(qū)分的，其原因是________。在上述篩選的基礎上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有_____的固體培養(yǎng)基。

（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其 DNA 復制所需的原料來自于___________。

A.①是纖維素酶和果膠酶，②是融合的原生質(zhì)體

B.②到③過程中高爾基體活動明顯增強

C.將愈傷組織包埋在人工種皮中，就形成了人工種子

D.④長成的植株需要選擇的原因是有耐鹽高產(chǎn)和耐鹽不高產(chǎn)兩種