科研人員建立了一種新的靶向基因敲除技術(shù)——TALEN技術(shù)（原理見下圖）。TALEN技術(shù)使用的基因敲除工具是由DNA識別域和核酸內(nèi)切酶兩個(gè)部分組成的蛋白質(zhì)�？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)了一種細(xì)菌蛋白質(zhì)（TALE），它的二連氨基酸（NI、NG、HD、NN，其中字母N、I、G、H、D分別代表了一種氨基酸）與四種堿基（A、G、C、T）有恒定的對應(yīng)關(guān)系：NI識別A，NG識別T，HD識別C，NN識別G。FokⅠ是一種形成二聚體后具有核酸內(nèi)切酶活性的蛋白單體。因此，可以利用TALE作為DNA識別域，用FokⅠ二聚體定點(diǎn)切斷DNA。

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)水稻植株無論是否具有光周期敏感蛋白基因P，在短日照條件下均表現(xiàn)為雄性可育。在長日照條件下，具有光周期敏感蛋白的水稻才能雄性可育�；�因P只在單倍體花粉細(xì)胞中表達(dá)，使其能夠合成淀粉�？蒲腥藛T使用TALEN技術(shù)對水稻基因P進(jìn)行靶向敲除，以得到光敏雄性不育水稻新品種。

（1）在TALEN技術(shù)的設(shè)計(jì)中，選擇使用FokⅠ單體而不直接使用FokⅠ二聚體，這樣能減少對DNA的__________切割，保證了基因敲除的靶向性。為了讓TALEN技術(shù)能用于各種不同生物、不同基因的敲除，沒有與TALE蛋白結(jié)合的FokⅠ二聚體對DNA的切割應(yīng)__________（選填“具有”或“不具有”）類似于限制酶的“限制性”。

（2）若TALE蛋白左臂所識別的基因P的序列為“-TGACC-” ，則TALE蛋白左臂對應(yīng)的二連氨基酸序列應(yīng)為__________。用這種方法，可以確定TALE蛋白的氨基酸序列，進(jìn)而人工合成TALE蛋白基因。然后將TALE蛋白基因與__________基因進(jìn)行融合，得到融合基因。

（3）科研人員用圖2所示的質(zhì)粒為載體，其中的潮霉素抗性作為標(biāo)記基因，作用是__________。應(yīng)選用__________酶將該質(zhì)粒與融合基因構(gòu)建為重組質(zhì)粒，并將融合基因設(shè)法導(dǎo)入到水稻愈傷組織中，再利用__________技術(shù)獲得T0代植株。

（4）由于基因靶向敲除成功的概率比較低，所以科研人員培育T0代植株時(shí)應(yīng)保證__________日照條件，待其自花受粉得到T1代，再將T1代植株__________，并在開花期隨機(jī)選擇一部分植株的花粉進(jìn)行鑒定，鑒定方法是__________。若觀察到某植株的花粉全部未被染成藍(lán)色，則該植株為所需的純合光敏雄性不育新品種。

（5）與傳統(tǒng)的雄性不育水稻品種相比，光敏雄性不育新品種的優(yōu)勢在于它能實(shí)現(xiàn)自交繁殖并保留雄性不育特性，這是因?yàn)?/span>__________。

常規(guī)區(qū)：頻繁化學(xué)防治，噴施化學(xué)殺蟲藥劑9次；

實(shí)驗(yàn)1區(qū)：農(nóng)藥減施防治，噴施化學(xué)殺蟲藥劑4次；

實(shí)驗(yàn)2區(qū)：植物源藥物減施防治，噴施藥劑4次。

（1）為調(diào)查土壤線蟲數(shù)量以及種類，科研人員在梨園中__________選擇若干取樣點(diǎn)，采用__________法進(jìn)行調(diào)查。

（2）三個(gè)區(qū)線蟲數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖所示。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明__________。

（3）科研人員又根據(jù)線蟲的生活習(xí)性和取食特點(diǎn)，將土壤線蟲劃分為4個(gè)營養(yǎng)類群，再根據(jù)調(diào)查得到的線蟲種類，計(jì)算得到各營養(yǎng)類群的相對豐度如下表。

①梨園中的細(xì)菌、真菌、線蟲和植物等各種生物共同構(gòu)成了__________，各種線蟲在土壤中的分層現(xiàn)象，體現(xiàn)了群落的__________結(jié)構(gòu)。

②在0～20 cm土層，各營養(yǎng)類群線蟲相對豐度在3個(gè)區(qū)之間均無顯著性差異，而在＞20 cm土層，實(shí)驗(yàn)區(qū)__________，其余均無顯著性差異，群落結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變。

③土壤線蟲食性多樣化，使土壤生態(tài)系統(tǒng)營養(yǎng)結(jié)構(gòu)更加復(fù)雜，這對提高生態(tài)系統(tǒng)的__________具有重要意義。

（4）綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在農(nóng)藥脅迫較重的土壤淺層，土壤線蟲各營養(yǎng)類群均受到影響，導(dǎo)致不同處理間差異主要體現(xiàn)在土壤線蟲__________上，而在農(nóng)藥脅迫相對較輕的土壤深層，由于__________線蟲可能對農(nóng)藥更敏感，導(dǎo)致不同處理間差異主要體現(xiàn)線蟲的相對豐度上。

（1）茉莉酸是在植物生命活動(dòng)中傳遞__________，有顯著調(diào)節(jié)作用的微量有機(jī)物。

（2）科研人員設(shè)計(jì)了下圖所示裝置，將番茄葉片C1和J1置于封口的玻璃瓶中，其內(nèi)分別放置含清水或含茉莉酸（具有揮發(fā)性）的海綿，葉片M緊貼在玻璃瓶的封口外。4小時(shí)后，測定各葉片中蛋白P的mRNA量，結(jié)果如下表。

①本實(shí)驗(yàn)中，C1葉片的結(jié)果排除了__________（寫出兩點(diǎn)）的影響。

②本實(shí)驗(yàn)中， M葉片的結(jié)果說明，J2葉片蛋白P的mRNA量變化不是由__________引起的。

③本實(shí)驗(yàn)可以得出的兩個(gè)結(jié)論有__________。

（3）依據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請?zhí)岢鲆粋�(gè)清晰的、解釋J2葉片數(shù)據(jù)的科學(xué)假設(shè)：__________。

（4）其他研究結(jié)果表明，模擬葉片機(jī)械損傷可以誘導(dǎo)蛋白P的表達(dá)和脫落酸（ABA）含量增加�？蒲腥藛T推測，葉片受到機(jī)械損傷后內(nèi)源茉莉酸增加，誘導(dǎo)ABA合成增加，ABA進(jìn)而促進(jìn)蛋白P的表達(dá)。為驗(yàn)證上述推測，需要在上述已知事實(shí)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步補(bǔ)充下列實(shí)驗(yàn)中的__________（選填下列字母），以完善證據(jù)鏈。

a. 給葉片單獨(dú)施加ABA，檢測蛋白P含量

b. 給葉片同時(shí)施加ABA和茉莉酸，檢測蛋白P含量

c. 機(jī)械損傷葉片后，檢測損傷葉片的茉莉酸含量

d. 給葉片單獨(dú)施加茉莉酸，檢測ABA含量

A. 該生態(tài)系統(tǒng)中，處于第二營養(yǎng)級的生物有人和家禽家畜

B. 該生態(tài)系統(tǒng)中，人的作用非常關(guān)鍵，植物是主要成分

C. 該生態(tài)系統(tǒng)的建立，提高了各營養(yǎng)級間的能量傳遞效率

D. 沼氣池的建造和植樹造林，提高了該生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性

A.過程Ⅰ的研究利用了胚胎干細(xì)胞具有全能性的特點(diǎn)

B.過程Ⅰ中，囊胚的后一個(gè)階段形成了內(nèi)、中、外三個(gè)胚層及兩個(gè)囊胚腔

C.過程Ⅱ需要用到的工具酶有限制酶、DNA連接酶

D.過程Ⅱ還涉及胚胎工程的技術(shù)手段

（1）某HD家系圖（圖1）及每個(gè)個(gè)體CAG重復(fù)序列擴(kuò)增后，電泳結(jié)果如圖2。

①據(jù)圖1判斷HD是一種__________染色體遺傳病。

②據(jù)圖推測，當(dāng)個(gè)體的所有H基因中CAG重復(fù)次數(shù)__________25次時(shí)才可能不患病。與Ⅰ-1比較，Ⅱ-1并未患病，推測該病會(huì)伴隨__________呈漸進(jìn)性發(fā)病。

③與Ⅰ-1比較，Ⅱ-1、Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的H基因中CAG重復(fù)次數(shù)均有增加，這表明患者Ⅰ-1__________過程中異常H基因的重復(fù)次數(shù)會(huì)增加。

（2）由于缺乏合適的動(dòng)物模型用于藥物篩選，HD患者目前尚無有效的治療方法。我國科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)和體細(xì)胞核移植技術(shù)成功培育出世界首例含人類突變H基因的模型豬，操作過程如圖3。

①從可遺傳變異類型來看，模型豬發(fā)生的變異是__________。

②篩選含有目的基因的體細(xì)胞，將細(xì)胞核移植到__________中，構(gòu)建重組細(xì)胞，再將重組細(xì)胞發(fā)育來的早期胚胎移植到代孕母豬體內(nèi)，獲得子代F0，此過程體現(xiàn)出動(dòng)物細(xì)胞核具有__________。

③將F0與野生型雜交得到F1，F1再與野生型雜交得到F2。在F0、F1、F2中，更適合作為模型豬的是F2個(gè)體，理由是__________。

（1）患乳腺癌的病人幾乎都是女性，雌激素能刺激乳腺癌細(xì)胞生長和抑制凋亡。雌激素的化學(xué)本質(zhì)是__________，主要是由女性的__________分泌的。臨床研究發(fā)現(xiàn)，雌激素受體正常的患者使用Tam治療效果較好，受體異常患者療效較差，這是由于Tam在靶細(xì)胞內(nèi)與雌激素__________雌激素受體，降低了雌激素的作用。

（2）科研人員測定了初次使用Tam乳腺癌患者的癌細(xì)胞（細(xì)胞系C）和長期使用Tam乳腺癌患者的癌細(xì)胞（細(xì)胞系R）在不同Tam濃度下的死亡率，結(jié)果如圖1。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，長期使用Tam的患者癌細(xì)胞對Tam產(chǎn)生了__________性。

（3）為研究上述現(xiàn)象出現(xiàn)的原因，科研人員進(jìn)一步測定細(xì)胞系C和R的氧氣消耗速率及葡萄糖攝取速率，結(jié)果如圖2。

①由該實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測，由于細(xì)胞系R的細(xì)胞呼吸發(fā)生了__________的變化，從而使葡萄糖攝取速率明顯提高。

②一種驗(yàn)證上述推測的方法是檢測并比較__________產(chǎn)生量。

（4）根據(jù)以上研究，長期服用Tam的乳腺癌患者，可以同時(shí)服用__________的藥物，使Tam的抗癌效果更好。

A.用纖維素酶和果膠酶處理親本的體細(xì)胞

B.用電擊可促進(jìn)兩個(gè)親本的原生質(zhì)體融合

C.引物能與DNA上多個(gè)不同位點(diǎn)結(jié)合

D.電泳結(jié)果表明F1-1具有P1、P2的全部遺傳信息

A.基因工程除了需要包括圖一所示的工具外，還需兩種工具酶

B.圖二中2、3、4可分別表示受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植

C.圖三中將原腸胚分割有利于胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育

D.圖四中動(dòng)物細(xì)胞A和B到細(xì)胞C的過程中，可用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑

A.該食物網(wǎng)中最高營養(yǎng)級為第四營養(yǎng)級

B.該食物網(wǎng)中第一到第二營養(yǎng)級的能量傳遞效率為25%

C.太陽魚呼吸作用消耗的能量為1357 J·m-2·a-1

D.該食物網(wǎng)中的能量在不同營養(yǎng)級之間循環(huán)流動(dòng)