科目:高中生物 來源:2012屆廣東省汕頭市高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:選擇題
Taq DNA 聚合酶的發(fā)現(xiàn)使得PCR 技術(shù)的廣泛運用成為可能,這是因為
A.Taq DNA 聚合酶能使擴增反應(yīng)在 DNA 變性條件下進行
B.Taq DNA 聚合酶催化下的擴增反應(yīng)不需要引物
C.Taq DNA 聚合酶使擴增反應(yīng)不需要ATP
D.Taq DNA 聚合酶能使擴增反應(yīng)具有連續(xù)性
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
Taq DNA聚合酶是從一種嗜熱細菌中分離提取的,該菌是1966年從美國黃石國家森林公園的一個熱泉中發(fā)現(xiàn)的。實驗表明,PCR反應(yīng)時變性溫度為95 ℃,50個循環(huán)后,Taq DNA聚合酶仍有65%的活性。Taq DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性是該酶用于PCR的前提條件,也是PCR技術(shù)能迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用的原因。Taq DNA聚合酶還具有逆轉(zhuǎn)靈活性,其作用類似于逆轉(zhuǎn)錄酶。Taq DNA聚合酶表現(xiàn)為Mg2+依賴,該酶的催化活性對Mg 2+濃度非常敏感。測定結(jié)果為MgCl2濃度在2.0 mmol/L時該酶催化活性最高,此濃度能最大限度地激活Taq DNA聚合酶的活性,Mg2+過高就抑制酶活性,因而MgCl2的濃度在不同的反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)調(diào)整,優(yōu)化濃度。Taq DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性,而無3′→5′外切酶活性,它不具有校對活性。因而在PCR中如發(fā)生某些堿基的錯配,該酶是沒有校正功能的。Taq DNA聚合酶的堿基錯配幾率為2.1×10-4。
(1)Taq DNA聚合酶在高溫下仍保持活性,因此在PCR擴增時可以________加入,________(填“需要”或“不需要”)再添加。
(2)影響PCR反應(yīng)的影響因素除引物、反應(yīng)溫度、時間和TaqDNA聚合酶濃度外,從材料中可知,還應(yīng)有________。
(3)這種嗜熱細菌能夠在熱泉中生存,這是________的結(jié)果。
(4)PCR中由堿基錯配引起的變異屬于________。假設(shè)對一個DNA進行擴增,第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配,則擴增若干次后檢測所有DNA的擴增片段,與原DNA相應(yīng)片段相同的占________。
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科目:高中生物 來源: 題型:
PCR技術(shù)有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進行研究的問題,而被廣泛應(yīng)用,此過程需要一種Taq DNA聚合酶?
請回答有關(guān)問題:
(1)體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA,而PCR技術(shù)中應(yīng)用__________________?
(2)TaqDNA聚合酶是從水生耐熱細菌Taq中分離的?
①為什么Taq細菌能從熱泉中被篩選出來呢?
____________________________
②TaqDNA聚合酶的功能是____________________________?
③TaqDNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),可用________法和________法進行分離?
(3)從土壤中分離分解尿素的細菌時,應(yīng)采取的措施是_______________,原因是__________________________________?
(4)相對于細菌分離,而DNA分子的分離和提取操作要復(fù)雜的多?
①在DNA提取中兩次用到蒸餾水,其目的分別是:______________________?________________________?
②實驗中能否以哺乳動物成熟的紅細胞為實驗材料?為什么?
______________ , ______?
(5)與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較,PCR反應(yīng)要在________中才能進行,并且要嚴(yán)格控制________條件?
(6)PCR中加入的引物有________種,加入引物的作用是________________?
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科目:高中生物 來源: 題型:
(2012·南京模擬)酶制劑、固定化酶、固定化細胞已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于各個領(lǐng)域,下列有關(guān)敘述錯誤的是 ( )
A.90℃高溫會使Taq DNA聚合酶失去催化活性
B.制備固定化酶的方法主要有包埋法、交聯(lián)法和吸附法等
C.固定化酶在固定時可能會造成酶的損傷而影響活性
D.固定化細胞可以催化一系列酶促反應(yīng)
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