Question

2009年10月，我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻“華恢1號”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書。下圖表示該抗蟲水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）④過程應(yīng)用的主要生物技術(shù)是               。

（2）殺蟲基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并人工合成的，這屬于           工程技術(shù)范疇。

（3）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性內(nèi)切酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析：

①人工改造時(shí)，要使抗蟲基因表達(dá)，還應(yīng)插入____________。

②人工改造時(shí)用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的            （基因），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會引起細(xì)胞的無限分裂和生長；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于____         ____。第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。

③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長的現(xiàn)象是          。

（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為 ，則該酶識別的核苷酸序列是           。

 

Answer 1

【答案】

（1）植物組織培養(yǎng)

（2）蛋白質(zhì)

（3）①啟動(dòng)子

②tms和tmr（2分）  目的基因（或外源DNA）準(zhǔn)確插入

③在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長

（4）GACGTC

【解析】（1）將已分化的植物細(xì)胞培養(yǎng)成植物個(gè)體需采用植物組織培養(yǎng)的技術(shù)。

（2）對基因結(jié)構(gòu)進(jìn)行人工合成，生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)，屬于蛋白質(zhì)工程。

（3）要使抗蟲基因表達(dá)，需要啟動(dòng)子和終止子。使細(xì)胞分裂和生長的物質(zhì)是吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于目的基因的準(zhǔn)確插入。四環(huán)素抗性基因被限制酶破壞，青霉素抗性基因未被破壞。

（4）限制酶的識別序列具有回文結(jié)構(gòu)。