Question

【題目】[生物--選修3：現(xiàn)代生物科技專題]某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因）．有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化．被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌．回答下列問題：
（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有（答出兩點(diǎn)即可）．而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子．
（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是；并且和的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是 ． 在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有原因是的固體培養(yǎng)基．
（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于 ．

Answer 1

【答案】
（1）具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)、能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存
（2）不含有氨芐青霉素抗性基因，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都不能生長；含有質(zhì)粒的大腸桿菌；含重組質(zhì)粒的大腸桿菌；都含有氨芐青霉素抗性基因，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都能生長；四環(huán)素
（3）大腸桿菌或受體細(xì)胞
【解析】解：（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)、能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存．（2）由于未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的大腸桿菌中不含有氨芐青霉素抗性基因，因此如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的大腸桿菌均不能存活，因此兩者是不能區(qū)分的；含有質(zhì)粒的大腸桿菌和含重組質(zhì)粒的大腸桿菌的細(xì)胞由于均含有氨芐青霉素抗性基因，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都能生長，因此兩者也是不能區(qū)分的．在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有四環(huán)素的固體培養(yǎng)基，即含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌在其中不能生長，而含有普通質(zhì)粒的大腸桿菌能生長．（3）噬菌體屬于病毒，病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其DNA復(fù)制所需的原料來自于大腸桿菌．
所以答案是：（1）具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)、能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存（2）不含有氨芐青霉素抗性基因，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都不能生長 含有質(zhì)粒的大腸桿菌和含重組質(zhì)粒的大腸桿菌 都含有氨芐青霉素抗性基因，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都能生長 四環(huán)素（3）大腸桿菌
【考點(diǎn)精析】根據(jù)題目的已知條件，利用基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識(shí)可以得到問題的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)．