Question

【題目】（一)有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株�；卮饐栴}：

(1)無菌操作是微生物實驗中重要的一項技術，下列常用的無菌操作中錯誤的是（_____）

A.用酒精擦拭雙手

B.用氯氣消毒水源

C.實驗操作應在酒精燈火焰附近進行

D.玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）可用酒精擦拭

(2)在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以_______為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

(3)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即__________和_______。

(4)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力____________。

(二)為了更好地分解石油，通過基因工程產生超級細菌。下圖a表示基因工程中經常選用的載體——pBR322質粒,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，將使該基因失活，而不再具有相應的抗性。為了檢査載體是否導入原本沒有Ampr和Tetr的大腸桿菌(受體細胞），將大腸桿菌涂布在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖b的結果(黑點表示菌落）。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖c的結果（空圈表示與b對照無菌落的位置）。據此分析并回答：

(1)將重組的DNA分子導人受體細胞時，用________處理大腸桿菌，增大____________。

(2)pBR322質粒的化學本質是_______，其控制著__________等性狀。與圖c空圏相對應的圖b中的菌落表現型是___________，由此說明目的基因插入了_____________中。

(3)基因工程成功的標志是_______________________。

Answer 1

【答案】 D 原油 選擇 平板劃線法 稀釋涂布平板法 大 氯化鈣 細胞壁的通透性 DNA 抗氨芐青霉素和抗四環(huán)素 能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素 Tetr 目的基因在受體細胞中表達

【解析】試題分析：微生物接種常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。培養(yǎng)基按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，要選擇出某一特定的菌種，需要提供目的菌生長的必要條件，并抑制或阻止其他微生物的生長，要鑒別某一目的菌，需要用特別的試劑進行檢驗，通過觀察現象來確定。分析題圖：a表示質粒，其本質是雙鏈環(huán)狀DNA分子，其上含有標記基因Amrr、Tetr；b培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素，能在b上生存的是能抗氨芐青霉素的大腸桿菌，即含有Amrr；c培養(yǎng)基中含有四環(huán)素，能在該培養(yǎng)基上生存的是能抗四環(huán)素的大腸桿菌，即含有Tetr。

（一)（1）用酒精擦拭雙手屬于化學藥劑消毒，A正確；用氯氣消毒水源屬于化學藥劑消毒，B正確；實驗操作應在酒精燈火焰附近，因為高溫防止雜菌污染，C正確；玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）等應用干熱滅菌，酒精擦拭屬于消毒，不能殺滅所有微生物，D錯誤。

（2）篩選能分解原油的菌種應以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（3）純化菌種常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（4）分解圈越大說明利用原油的能力越大，降解能力越強。

（二)（1）將重組的DNA分子導入大腸桿菌細胞時，需要先用氯化鈣處理，增大其細胞壁的通透性。

（2）pBR322質粒的化學本質是雙鏈環(huán)狀DNA分子，其結構上的Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因，所以該質粒有抗氨芐青霉素和抗四環(huán)素的能力。圖b中的菌落能抗氨芐青霉素，圖c中的實心圈能抗氨芐青霉素和四環(huán)素，所以與圖c空圈相對應的圖b中的菌落能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素，由此說明目的基因插入了四環(huán)素抗性基因（Tetr）中。

（3）基因工程成功的標志是目的基因在受體細胞中表達出相關的蛋白質。