Question

【題目】轉(zhuǎn)基因克隆豬已經(jīng)在我國(guó)培育成功。研究組首先從豬胎兒皮膚細(xì)胞中分離出纖維細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)，通過(guò)電穿孔的方法將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入纖維細(xì)胞，經(jīng)篩選后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆。接著，將重組胚胎移入代孕母豬體內(nèi)，最終獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。請(qǐng)回答：

（1）在進(jìn)行體細(xì)胞克隆前，先要從屠宰場(chǎng)收集豬卵巢，采集__________，并在體外培養(yǎng)成熟。然后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞注入到__________中，再經(jīng)過(guò)一系列過(guò)程獲得含有目的基因重組胚胎。

（2）為了提高重組胚胎的利用率，可以對(duì)處于__________階段的胚胎進(jìn)行均等分割。將重組胚胎移入到受體子宮后，由于受體子宮不會(huì)對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，并能與之建立正常的__________上的聯(lián)系，因此重組胚胎能在受體子宮中繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因克隆豬。

（3）生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)即使某個(gè)物種由于某種原因而死亡，也會(huì)很快有其他物種占據(jù)它原來(lái)的生態(tài)位置，從而避免系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能失衡。這最主要體現(xiàn)了生態(tài)工程的__________原理（只填一項(xiàng)）。

Answer 1

【答案】卵母細(xì)胞 去核卵母細(xì)胞 桑椹胚或囊胚 生理和組織 物種多樣性

【解析】

1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)，個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
3、胚胎移植的生理基礎(chǔ)（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；
（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；
（3）子宮不對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。
4、選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)。
5、物種多樣性原理：物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性。

（1）體細(xì)胞克隆是將體細(xì)胞核移植入去核的卵母細(xì)胞中，卵母細(xì)胞可從屠宰場(chǎng)收集豬的卵巢，并在體外培養(yǎng)成熟。將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞注入到去核卵母細(xì)胞中，再經(jīng)過(guò)一系列過(guò)程獲得含有目的基因重組胚胎。

（2）為了提高重組胚胎的利用率，可以對(duì)處于桑椹胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行均等分割；將重組胚胎移入到受體子宮中之所以成功，原因之一是由于受體子宮不會(huì)對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，并能與之建立正常的生理和組織上的聯(lián)系，因此，重組胚胎能在受體子宮中繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因克隆豬。

（3）題干材料反映的是生物多樣性程度高，可以為各類(lèi)生物的生存提供多種機(jī)會(huì)和條件，因此應(yīng)體現(xiàn)生態(tài)工程的物種多樣性原理。