Question

【題目】石油污染土壤的微生物修復(fù)技術(shù)得到廣泛研究和應(yīng)用�；卮鹣嚓P(guān)問(wèn)題：

（1）采用向多孔結(jié)構(gòu)的污染土壤中通入空氣可有效的促進(jìn)石油的分解，原因是_____________________。石油主要含有碳和氫屬于____________，還需加入適量____________進(jìn)而加快石油污染物的降解。

（2）如圖是純化分解石油的單一假單胞菌的一種方法。該培養(yǎng)基在滅菌前需要____________，進(jìn)行倒平板的操作時(shí)對(duì)環(huán)境的要求是________________________。

（3）圖中依次進(jìn)行四區(qū)劃線，四區(qū)的面積要求為C＜D＜E＜F，F(xiàn)區(qū)面積最大有利于獲得____________。注意F區(qū)劃線不要與________________________（填字母）區(qū)相連。

（4）如果需要對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)則需要用稀釋涂布平板法。稀釋樣品液至一定范圍的目的是____________；這種方法統(tǒng)計(jì)的明顯不足之處是____________。

Answer 1

【答案】 土壤中含有許多分解石油的微生物，這些微生物是需氧生物（或進(jìn)行有氧呼吸） 碳源 氮源和無(wú)機(jī)鹽 調(diào)節(jié)pH 在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作 單個(gè)菌落 C（或C、D） 保證獲得菌落數(shù)為30－300之間，適于平板計(jì)數(shù) 菌落數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)少

【解析】培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、生長(zhǎng)因子以及氧氣的要求，石油主要含有碳和氫，相當(dāng)于碳源。制備培養(yǎng)基的步驟是：計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板，為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。平板劃線操作時(shí)要求每次劃線都從上次劃線末端開始，且每次劃線前都要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌，最后一次劃的線不能與第一次劃的線相交。稀釋涂布平板法在實(shí)際操作中通常選用一定稀釋范圍的樣液進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)菌落數(shù)為30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上只能觀察到一個(gè)菌落，因此采用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果偏小。

（1）向多孔結(jié)構(gòu)的污染土壤中通入空氣，可促進(jìn)微生物的有氧呼吸；石油主要含有碳和氫，相當(dāng)于培養(yǎng)基中的碳源，此外，為了促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)繁殖，加快石油污染物的降解，還需加入適量氮源和無(wú)機(jī)鹽。

（2）培養(yǎng)基在滅菌前需要調(diào)節(jié)pH，進(jìn)行倒平板的操作時(shí)應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，避免周圍環(huán)境中微生物的污染。

（3）最后劃線的F區(qū)域最易獲得單菌落，且要求F區(qū)劃線不能與C區(qū)重合。

（4）稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)時(shí)只計(jì)數(shù)菌落數(shù)為30-300的平板，因此需要將樣液稀釋到一定范圍；兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只有一個(gè)菌落，因此，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。