Question

2009年10月，我國自主研發(fā)的轉基因抗蟲水稻“華恢1號”獲得農業(yè)部頒發(fā)的安全證書。下圖表示該抗蟲水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）④過程應用的主要生物技術是                    。

（2）殺蟲基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結構，設計并人工合成的，這屬于                    工程技術范疇。

（3）組建理想的載體需要對天然的質粒進行改造。下圖是天然土壤農桿菌Ti質粒結構示意圖（示部分基因及部分限制性內切酶作用位點），據(jù)圖分析：

①人工改造時，要使抗蟲基因表達，還應插入                            。

②人工改造時用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質粒上的         和         （基因），保證T-DNA進入水稻細胞后不會引起細胞的無限分裂和生長；第二，使質粒帶有單一限制酶作用位點，有利于                                       。第三，使質粒大小合適，可以提高轉化效率等。

③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過的理想質粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構成重組Ti質粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導入抗蟲基因的水稻胚細胞，觀察到的細胞生長的現(xiàn)象是                                                       。

（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為，則該酶識別的核苷酸序列是                               。

 

Answer 1

【答案】

（1）植物組織培養(yǎng)

（2）蛋白質

（3）①啟動子

②tms和tmr（2分） 目的基因（或外源DNA）準確插入

③在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長2分

（4）GACGTC

【解析】

試題分析：如圖導入目的基因的受體細胞培養(yǎng)成植株需要用到植物組織培養(yǎng)技術。生產出自然界沒有的蛋白質屬于蛋白質工程，基因表達載體一般由目的基因，標記基因，啟動子、終止子等部分組成。如圖tms和tmr是控制生長素和細胞分裂素的基因所以應去除。為了目的基因的準確插入應使質粒帶有單一限制酶作用位點。改造后的質粒沒有抗四環(huán)素的標記基因所以以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長。根據(jù)黏性末端的堿基可推測該酶識別的核苷酸序列為GACGTC。

考點：基因工程

點評：本題考查了學生的識圖分析能力，難度適中，解題的關鍵是明確基因工程的過程。