大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:

(1)作為受體大腸桿菌應(yīng)__________________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(增加其細(xì)胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入          
(2)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入____________________等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。
(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:
                                                          。
                                                           。

(1)不含氨芐青霉素抗性基因(或?qū)Π逼S青霉素敏感)   在試管Ⅰ中制備好的DNA  (2)IPTG、X-gal、氨芐青霉素
(3)①如果長出藍(lán)色菌落,說明運(yùn)載體pUC118質(zhì)粒已轉(zhuǎn)入受體菌,但目的基因沒有接入運(yùn)載體(或說明重組質(zhì)粒沒導(dǎo)入受體大腸桿菌)②如果長出白色菌落,說明重組質(zhì)粒已導(dǎo)入受體大腸桿菌

解析

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解

大腸桿菌是生物學(xué)及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中最有代表性的模式生物之一。

(1)大腸桿菌與飲水安全。

    國家規(guī)定,每升飲用水中大腸菌數(shù)不得超過3個。有人測定某飲用水中的大腸桿菌(群)數(shù):先將1升飲用水水樣濃縮至10毫升,然后各取濃縮水樣的2毫升,涂布到5個培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)后計(jì)數(shù)的菌落數(shù)分別是9、12、5、8、6。請回答下列問題:

1)根據(jù)上述結(jié)果計(jì)算,被檢水樣大腸菌群數(shù)為________,水樣________ (能、不能)達(dá)標(biāo)。2)檢測過程中需要培養(yǎng)大腸菌菌群,培養(yǎng)基配方如下:

瓊脂

蛋白胨

乳糖

蔗糖

K2HPO4

伊紅

美藍(lán)

蒸餾水

pH

15 g

10 g

5 g

5 g

2 g

0.4 g

0. 065 g

1000 mL

7.2

    從培養(yǎng)基配方可以確定大腸桿菌的營養(yǎng)類型是                 ;從培養(yǎng)基功能可以確定其類型是              培養(yǎng)基,理由是                                    。

3)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_______________________________________________________。

(2)大腸桿菌與基因工程。

大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶。當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答問題:

1)質(zhì)粒結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是                       。

2)作為受體大腸桿菌應(yīng)不含氨芐青霉素抗性基因,原因是                             。

3)試管Ⅱ中用氯化鈣溶液處理(增加其細(xì)胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,并在培養(yǎng)基中加入                                   。

3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:

                                                                               。

                                                                               。

(3)選擇大腸桿菌作為研究材料,主要原因是:它體積小、結(jié)構(gòu)簡單、             、

             等。

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科目:高中生物 來源:2014屆浙江東陽中學(xué)高三10月月考生物試卷(解析版) 題型:選擇題

大腸桿菌pUC118質(zhì)粒具有氨芐青霉素抗性基因,某限制性核酸內(nèi)切酶唯一切點(diǎn)位于該質(zhì)粒的lacZ基因中。在特定的選擇培養(yǎng)基中,若lacZ基因沒有被破壞,則大腸桿菌菌落呈藍(lán)色;若lacZ基因被破壞,則菌落呈白色。右圖表示轉(zhuǎn)基因操作過程。下列說法錯誤的是

A.作為受體大腸桿菌應(yīng)不含氨芐青霉素抗性基因,以便于篩選

B.若大腸桿菌的菌落為藍(lán)色,則質(zhì)粒未導(dǎo)入大腸桿菌

C.選擇培養(yǎng)基中除必需的營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入適量氨芐青霉素

D.應(yīng)選擇白色菌落的大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)

 

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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年浙江省高三第一次月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題

(6分)大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。右圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:

(1)作為受體大腸桿菌應(yīng)______________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(目的是                        )過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入                      。

(2)圖中的培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入___________等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。

(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)

入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:

                                                                         。

                                                                         。

 

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科目:高中生物 來源:浙江省五校2009—2010學(xué)年度高三第一次聯(lián)考(生物)試題 題型:選擇題

大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:

   (1)作為受體大腸桿菌應(yīng)__________________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(增加其細(xì)胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入          

   (2)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入____________________等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。

   (3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:

                                                           。

                                                            。

 

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