大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:
(1)作為受體大腸桿菌應(yīng)__________________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(增加其細(xì)胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入 。
(2)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入____________________等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。
(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:
① 。
② 。
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
大腸桿菌是生物學(xué)及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中最有代表性的模式生物之一。
(1)大腸桿菌與飲水安全。
國家規(guī)定,每升飲用水中大腸菌數(shù)不得超過3個。有人測定某飲用水中的大腸桿菌(群)數(shù):先將1升飲用水水樣濃縮至10毫升,然后各取濃縮水樣的2毫升,涂布到5個培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)后計(jì)數(shù)的菌落數(shù)分別是9、12、5、8、6。請回答下列問題:
1)根據(jù)上述結(jié)果計(jì)算,被檢水樣大腸菌群數(shù)為________,水樣________ (能、不能)達(dá)標(biāo)。2)檢測過程中需要培養(yǎng)大腸菌菌群,培養(yǎng)基配方如下:
瓊脂 | 蛋白胨 | 乳糖 | 蔗糖 | K2HPO4 | 伊紅 | 美藍(lán) | 蒸餾水 | pH |
15 g | 10 g | 5 g | 5 g | 2 g | 0.4 g | 0. 065 g | 1000 mL | 7.2 |
從培養(yǎng)基配方可以確定大腸桿菌的營養(yǎng)類型是 ;從培養(yǎng)基功能可以確定其類型是 培養(yǎng)基,理由是 。
3)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_______________________________________________________。
(2)大腸桿菌與基因工程。
大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶。當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答問題:
1)質(zhì)粒結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是 。
2)作為受體大腸桿菌應(yīng)不含氨芐青霉素抗性基因,原因是 。
3)試管Ⅱ中用氯化鈣溶液處理(增加其細(xì)胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,并在培養(yǎng)基中加入 。
3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:
① 。
② 。
(3)選擇大腸桿菌作為研究材料,主要原因是:它體積小、結(jié)構(gòu)簡單、 、
等。
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科目:高中生物 來源:2014屆浙江東陽中學(xué)高三10月月考生物試卷(解析版) 題型:選擇題
大腸桿菌pUC118質(zhì)粒具有氨芐青霉素抗性基因,某限制性核酸內(nèi)切酶唯一切點(diǎn)位于該質(zhì)粒的lacZ基因中。在特定的選擇培養(yǎng)基中,若lacZ基因沒有被破壞,則大腸桿菌菌落呈藍(lán)色;若lacZ基因被破壞,則菌落呈白色。右圖表示轉(zhuǎn)基因操作過程。下列說法錯誤的是
A.作為受體大腸桿菌應(yīng)不含氨芐青霉素抗性基因,以便于篩選
B.若大腸桿菌的菌落為藍(lán)色,則質(zhì)粒未導(dǎo)入大腸桿菌
C.選擇培養(yǎng)基中除必需的營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入適量氨芐青霉素
D.應(yīng)選擇白色菌落的大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)
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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年浙江省高三第一次月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(6分)大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。右圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:
(1)作為受體大腸桿菌應(yīng)______________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(目的是 )過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入 。
(2)圖中的培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入___________等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。
(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)
入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:
① 。
② 。
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科目:高中生物 來源:浙江省五校2009—2010學(xué)年度高三第一次聯(lián)考(生物)試題 題型:選擇題
大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:
(1)作為受體大腸桿菌應(yīng)__________________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(增加其細(xì)胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入 。
(2)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入____________________等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。
(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,請預(yù)測菌落的顏色,并分析結(jié)果:
① 。
② 。
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