Question

【題目】重組人血小板生成素（rhTPO)是一種新發(fā)現(xiàn)的造血生長(zhǎng)因子，如圖為通過(guò)乳腺生物發(fā)生器產(chǎn)生rhTPO的相關(guān)過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)選用的限制酶是____________，原因是__________________。重組質(zhì)粒中的標(biāo)記基因是___________，標(biāo)記基因的作用是_________________________。

（2）通常采用__________技術(shù)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵，圖中所示的過(guò)程與胚胎工程相關(guān)的有_________(至少寫出兩個(gè)）。

（3）若檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，檢測(cè)方法是___________技術(shù)，其次還需檢測(cè)目的基因____________，這是檢測(cè)目的基因是否發(fā)揮作用的第一步，最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。

Answer 1

【答案】 HindⅢ和XhoⅠ SmaⅠ的酶切位點(diǎn)位于目的基因中間，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因（或用HndⅢ和XhoⅠ可以得到完整的目的基因) 抗卡那霉素基因 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，以便篩選 顯微注射 體外受精、早期胚胎培養(yǎng)(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)）、胚胎移植 DNA分子雜交 是否轉(zhuǎn)錄出mRNA

【解析】本題結(jié)合圖形考查基因工程和胚胎工程，要求考生理解相關(guān)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。

（1）結(jié)合題意分析圖形可知，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)選用的限制酶是HindⅢ和XhoⅠ，原因是SmaⅠ的酶切位點(diǎn)位于目的基因中間，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因，而用HndⅢ和XhoⅠ可以得到完整的目的基因；同時(shí)用HndⅢ和XhoⅠ還可以保證切割后的目的基因與質(zhì)粒具有相同的末端，以便于在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒。由于使用HndⅢ和XhoⅠ切割質(zhì)粒是會(huì)破壞質(zhì)粒中的抗四環(huán)素基因而不會(huì)破壞抗氨芐青霉素基因，因此重組質(zhì)粒中的標(biāo)記基因是抗卡那霉素基因，標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，以便篩選。

（2）動(dòng)物基因工程中，通常采用顯微注射技術(shù)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵；圖中所示的過(guò)程與胚胎工程相關(guān)的有體外受精、早期胚胎培養(yǎng)(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)）、胚胎移植。

（3）若檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，檢測(cè)方法是DNA分子雜交技術(shù)，其次還需檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，這是檢測(cè)目的基因是否發(fā)揮作用的第一步，最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。