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科目:高中生物 來源:上海市長寧區(qū)2012屆高三上學(xué)期期末質(zhì)量抽測生物試題 題型:071
回答有關(guān)生物工程的問題。
小鼠是實驗室常用的實驗動物,如:利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中導(dǎo)致了“基因敲除”技術(shù)的出現(xiàn)。
用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。
1.將小鼠等分為兩組,甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液,其目的是_________;乙組注射_________。
2.一段時間后,取甲組小鼠脾臟中的相應(yīng)細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合,細(xì)胞融合的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是_________。融合形成的雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)是_________。
3.為了保存有價值的雜交瘤細(xì)胞系,通常用超低溫將其凍存,請分析其原_________。
用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù),能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過程如下:
第一步:分離小鼠胚胎干細(xì)胞,這些細(xì)胞中含有需要改造的基因,稱“靶基因”。
第二步:獲取與“靶基因”同源的DNA片斷,利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因)成為突變DNA(如下圖),使該片段上的靶基因失活。
第三步:將插入neoR基因(新霉素抗性基因)的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞,再通過同源互換,用失活靶基因取代兩個正常靶基因中的一個,完成對胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:將第三步處理后的胚胎干細(xì)胞,轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。
其基本原理如下圖所示:
4.第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是_________。neoR基因不僅能使靶基因失活,還是_________;“靶基因失活”的含義是_________。
5.從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個靶基因的胚胎干細(xì)胞,到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠,運(yùn)用到的生物技術(shù)有_________、_________等。
6.科學(xué)家可以通過“基因敲除”來研究基因的功能,4題中獲得的基因敲除小鼠,能否直接用來研究基因功能并說明原因_________。
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科目:高中生物 來源: 題型:
35.(7分)棉鈴蟲是一種危害棉花的害蟲。我國科學(xué)工作者發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死,而這種毒蛋白對人畜無害。通過基因工程方法,科學(xué)家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并成功表達(dá),棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡;ǚ酃芡ǖ婪ㄊ侵福豪弥参锘ǚ勖劝l(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊,進(jìn)而導(dǎo)入尚不具備細(xì)胞壁的合子或早期胚細(xì)胞,最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,省去了組培的復(fù)雜過程。
(1)利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)朊藁?xì)胞,此過程是基因操作的基本步驟中的第三步,即 。構(gòu)建基因表達(dá)載體時要把目的基因整合到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,其原因是 。
(2)基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運(yùn)載體上。限制酶可以識別特定的DNA序列,并切斷 鍵。下列所示的黏性末端是由 種限制酶作用產(chǎn)生的。
(3)用標(biāo)記的特異性抗體可以直接檢測毒蛋白,這種檢測方法稱為 。
也可在宏觀性狀水平檢測該目的基因是否表達(dá),方法是 。已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體,使細(xì)胞膜穿孔,腸細(xì)胞裂解,昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小,原因是人類腸上皮細(xì)胞 。
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