Question

【題目】如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、Sma I直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)．據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進(jìn)行．能驅(qū)動人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控因子是圖中的 ．過程①采用的操作方法通常是 ．
（2）過程②代表的生物技術(shù)是 ．對早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體．目前最常見的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵 胎．
（3）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用 技術(shù)．
（4）對代孕牛的要求是

Answer 1

【答案】HindⅢ和BamHⅠ；氨芐青霉素；啟動子；顯微注射；胚胎移植；雙；抗原﹣抗體雜交；有健康體質(zhì)和正常繁殖能力
【解析】解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaI的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的 基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后，會破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．啟動子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序 列．過程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，當(dāng)受體細(xì)胞是動物細(xì)胞時，將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（2）過程②需要采用胚胎移植技術(shù)；目前最常見的是經(jīng)胚胎分割產(chǎn)生的同卵雙胎．
（3）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用抗原﹣抗體雜交技術(shù)．
（4）對代孕牛的要求是有健康體質(zhì)和正常繁殖能力．
【考點(diǎn)精析】通過靈活運(yùn)用基因工程的原理及技術(shù)，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)即可以解答此題．