Question

【題目】苯酚是染料、農藥和醫(yī)藥等行業(yè)的重要生產原料和中間體，是工業(yè)廢水的常見污染物之一。某研究小組為了處理高濃度含苯酚廢水，從處理廢水的活性污泥中分離篩選得到能高效降解 苯酚的細菌，如圖為實驗過程部分圖示。

（1）實驗用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿采用的滅菌方法是__ ；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應該___________。

（2）為了篩選降解苯酚的細菌，本實驗所選用的培養(yǎng)基必須以__________________________________ 為唯一碳源。從上圖分析本實驗選用________獲得降解苯酚的單菌落。

（3）分離純化得到能高效降解苯酚的細菌，應對其進行________ 培養(yǎng)，培養(yǎng)后若要測定培養(yǎng)液中該菌的數(shù)目，可在顯微鏡下用___ 直接計數(shù)，該方法的測量值比活菌的實際數(shù)目_______ 。最后應將菌種劃線接種在斜面上，37℃培養(yǎng) 24h 后，置于_______ 保存。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 用牛皮紙（或報紙）包扎器皿 苯酚 涂布分離法 （稀釋涂布法） 擴大 血細胞計數(shù)板 大 4℃冰箱

【解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH

、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。

2、兩種純化細菌的方法的比較

	優(yōu)點	缺點	適用范圍
平板劃線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離	不能計數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布平板法	可以計數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧菌

3、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

（1）實驗用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應該用牛皮紙（或報紙）包扎器皿。

（2）為了篩選降解苯酚的細菌，本實驗所選用的培養(yǎng)基必須以苯酚為唯一碳源。從上圖分析本實驗選用涂布分離法（稀釋涂布法）獲得降解苯酚的單菌落。

（3）分離純化得到能高效降解苯酚的細菌，應對其進行擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)后若要測定培養(yǎng)液中該菌的數(shù)目，可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)，該方法會把死菌計入在內，故其測量值比活菌的實際數(shù)目大。最后應將菌種劃線接種在斜面上，37℃培養(yǎng) 24h 后，置于4℃冰箱保存。