Question

測定蛋白質的相對分子質量常用的測定方法是凝膠色譜法。請回答下列問題：

（1）凝膠色譜法的原理是                                                        。

（2）在裝填凝膠柱時不得有氣泡的原因是                                         。

（3）某人欲使用凝膠色譜法比較A、B兩種蛋白質的分子質量大小，請你選擇需要的材料，幫助其設計實驗步驟，并預測實驗結果，得出相關結論。

實驗步驟：                                                                     

實驗結果及結論：                                                              

                                                                               

 （4）若由凝膠過濾法測得某一由2條肽鏈構成的蛋白質的相對分子質量為m，且已知氨基酸的平均相對分子質量為n。則該蛋白質是由        個氨基酸經(jīng)脫水縮合而成的。

Answer 1

(1）根據(jù)相對分子質量的大小分離蛋白質

（2）氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果

（3）實驗步驟：將含有A、B兩種蛋白質的混合液加入裝滿凝膠的玻璃管上端，用緩沖液進行洗脫，檢測它們洗脫的先后順序

實驗結果及結論：若A先于B洗脫出來，則A的相對分子質量大于B；若B先于A洗脫出來，則B的相對分子質量大于A

(4)   (m-36)/(n-18)

解析:

（1）利用凝膠色譜法，其中的蛋白質分子在凝膠的孔徑中經(jīng)過，經(jīng)歷的路徑長花費時間長，故最后從凝膠中洗脫出來；（2）氣泡使液相中存在氣相，會干擾蛋白質的洗脫 （4）可設a個氨基酸，列na-(a-2)18=m方程式求得。