Question

【題目】養(yǎng)蠶、繅絲、織綢等蠶業(yè)在我國已有四千多年的歷史。在蠶絲加工過程中，需要將蠶絲中的絲膠（化學成分主要為蛋白質）從絲纖維上分離下來，用酶進行蠶絲脫膠成本低、效率高且污染少。回答相關問題：

（1）蠶絲脫膠酶只分解絲膠不分解絲纖維，表明絲纖維蛋白與絲膠蛋白在結構上有________（填“少許”或“明顯”）區(qū)別。為了獲得能產生用于蠶絲脫膠且對絲纖維損傷小的蛋白酶的微生物單菌落，可從絲廠周邊土壤中取樣，并應選用以________為碳源的_______培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

（2）若要測定培養(yǎng)液中微生物的菌體數，可在顯微鏡下用_______________直接計數；若要測定其活菌數量，可選用___________________法進行計數。

（3）酶脫膠在_____________溫下進行，菌株產酶能力及酶活力還受初始發(fā)酵pH影響。為了確定獲得產酶發(fā)酵最適初始pH，某同學測得相同時間內，在pH值為7、10、12時降解10g蠶絲粗品的脫膠活力相對值依次為7、10．5、5、9．8。為了進一步確定所選菌株發(fā)酵產酶的最適初始pH，接下來的實驗思路是：_____________________________________________。

（4）所獲得的菌種需要長期保藏，可以采用_________________的方法，通常需要在________________________中保存。

Answer 1

【答案】明顯??? 蛋白質??? 固體??? 血細胞計數板??? 稀釋涂布平板??? 常??? 應圍繞pH值10設計系列梯度pH，在相同時間內，測得各pH下降解一定量蠶絲粗品絲膠的脫膠活力相對值，最大脫膠活力相對值時的初始pH即為最適初始pH??? 甘油管藏??? 冷凍冰箱???

【解析】

酶具有專一性的特性，蛋白質的空間結構不同形式的功能也有差別，因此不同的蛋白質可能需要不同的酶分析。微生物的計數可以使用顯微鏡觀察法直接觀察細胞的個數，也可以使用稀釋涂布平板法間接計算微生物的數量。

（1）絲纖維蛋白與絲膠蛋白在結構上有明顯的差異使得酶不能識別從而不能催化分解；由于生產生需要對蠶絲脫膠且對絲纖維損傷小，因此想要使用酶分解絲膠蛋白，所以應該使用以蛋白質為唯一碳源的固體培養(yǎng)基做選擇培養(yǎng)；

（2）微生物的直接計數方法為顯微鏡計數法，間接計數的方法為稀釋涂布平板法，一般稀釋涂布平板法可以對活菌進行計數；

（3）酶具有反應條件溫和的特點，作用溫度要求常溫；該題中所研究的PH數據中，在pH為10時具有較強的分解能力，因此可以設計實驗圍繞pH值10設計系列梯度pH，在相同時間內，測得各pH下降解一定量蠶絲粗品絲膠的脫膠活力相對值，最大脫膠活力相對值時的初始pH即為最適初始pH；

（4）菌種的保藏中長期保藏需要使用甘油管藏，需要溫度為零下4攝氏度，因此在冷凍冰箱保存。