Question

【題目】圖甲、乙中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。培育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A.若通過PCR技術(shù)提取該目的基因，應(yīng)該選用引物甲和引物丙

B.圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體，應(yīng)選用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切

C.若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中，需選用感受態(tài)的大腸桿菌

D.在受體細(xì)胞中，氨芐青霉素抗性基因和目的基因可同時(shí)表達(dá)

Answer 1

【答案】D

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：
（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。
（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

A、若通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增該目的基因，應(yīng)該選用引物甲和引物丙，A正確；

B、圖甲中BamHⅠ同時(shí)切壞兩種抗性基因，不能選用，故圖乙中目的基因左側(cè)只能選BclⅠ，而質(zhì)粒上沒有目的基因右側(cè)Sau3A的切點(diǎn)，兩者都有Hind Ⅲ的切點(diǎn)，為了防止目的基因與質(zhì)粒隨意連接，故質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體，應(yīng)選用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切，B正確；

C、若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞大腸桿菌時(shí)，需用鈣離子等處理，使其處于感受態(tài)，C正確；

D、在受體細(xì)胞中，插入目的基因時(shí)氨芐青霉素抗性基因被破壞，不能和目的基因可同時(shí)表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選D。