Question

【題目】CAR-T 療法是通過設(shè)計(jì)CAR 基因，并導(dǎo)入癌癥患者的 T 細(xì)胞中，使其轉(zhuǎn)化為 CAR-T 細(xì)胞，CAR-T細(xì)胞膜上的 CAR 蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后，激活 CAR-T 細(xì)胞使其增殖、分化，從而實(shí)現(xiàn)對癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶，主要過程如圖。

【1】過程①中需要用到的兩種酶是_____、_____。過程③在基因工程操作步驟中屬于_____。

【2】將 CAR 基因?qū)�入患�?/span> T 細(xì)胞前，必須先完成過程②，原因可能是_____。

A.CAR 基因片段小，容易丟失

B.CAR 基因分子量大，不易通過細(xì)胞膜

C.CAR 基因易被降解

D.CAR 基因在 T 細(xì)胞中不能復(fù)制

【3】CAR-T 療法屬于_____。

A.動(dòng)物基因工程B.酶工程

C.微生物基因工程D.發(fā)酵工程

【4】根據(jù)圖示，CAR-T 細(xì)胞對癌細(xì)胞的殺傷具有特異性，主要取決于 CAR 蛋白：______區(qū)。CAR-T療法具有持久性是因?yàn)?/span>_____。

【5】研究發(fā)現(xiàn)，其他細(xì)胞經(jīng)過改造，細(xì)胞膜上的 CAR 蛋白也會成為抗原，產(chǎn)生不良反應(yīng)。以下屬于限制CAR-T療法運(yùn)用的原因有_________。

A.腫瘤病人前期化療導(dǎo)致 T 細(xì)胞不足

B.收集的 T 細(xì)胞不純，混入 B 細(xì)胞

C.患者正常細(xì)胞膜上也有相似抗原

D.pCDH質(zhì)粒上具有抗性基因

Answer 1

【答案】

【1】 限制酶 DNA 連接酶 重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞

【2】ACD

【3】A

【4】 胞外結(jié)合 CAR-T 細(xì)胞形成記憶細(xì)胞

【5】ABC

【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按照一定的程序進(jìn)行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱（宿主）細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面。

【1】過程①是體外合成CAR 基因的過程，需要限制酶將三個(gè)片段切割得到互補(bǔ)的粘性末端，再用DNA 連接酶將其連接。過程③是將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞（患者T細(xì)胞）的過程。

【2】將 CAR 基因?qū)�入患�?/span> T 細(xì)胞前，必須先完成過程②，原因可能是CAR 基因片段�。ㄒ讈G失）、CAR 基因易被降解（形成重組質(zhì)粒不易被降解）、CAR 基因在 T 細(xì)胞中不能復(fù)制（重組質(zhì)粒含復(fù)制原點(diǎn)），故選ACD。

【3】CAR-T 療法是將CAR 基因?qū)�入患�?/span> T 細(xì)胞的過程，屬于動(dòng)物基因工程，故選A。

【4】CAR-T 細(xì)胞對癌細(xì)胞的殺傷具有特異性，主要取決于 CAR 蛋白胞外結(jié)合區(qū)，CAR-T細(xì)胞膜上的 CAR 蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后，激活 CAR-T 細(xì)胞使其增殖、分化。CAR-T療法具有持久性是因?yàn)?/span>CAR-T 細(xì)胞形成記憶細(xì)胞，記憶細(xì)胞能識別抗原（癌細(xì)胞），持續(xù)引發(fā)免疫應(yīng)答。

【5】其他細(xì)胞經(jīng)過改造，細(xì)胞膜上的 CAR 蛋白也會成為抗原，產(chǎn)生不良反應(yīng)，限制CAR-T療法運(yùn)用的原因有腫瘤病人前期化療導(dǎo)致 T 細(xì)胞不足（T細(xì)胞不會產(chǎn)生不良反應(yīng)）、收集的 T 細(xì)胞不純（有其它細(xì)胞混入，產(chǎn)生不良反應(yīng)），混入 B 細(xì)胞（細(xì)胞膜上的 CAR 蛋白也會成為抗原，產(chǎn)生不良反應(yīng)）、患者正常細(xì)胞膜上也有相似抗原（產(chǎn)生不良反應(yīng)），故選ABC。

本題主要考查CAR-T療法的機(jī)制，將基因工程的原理和操作與免疫應(yīng)答相結(jié)合，要求學(xué)生有一定的分析推理能力。