Question

【題目】下面是科學(xué)家利用現(xiàn)代生物技術(shù)研制用于癌癥治療的鼠一人嵌合抗體的流程圖。請(qǐng)回答:

（1）利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造時(shí)，首先必須根據(jù)預(yù)期________，設(shè)計(jì)________，進(jìn)一步推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，最終通過(guò)基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠－人嵌合抗體基因，然后導(dǎo)入鼠淋巴細(xì)胞中使其表達(dá)。在lg基因表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程中，人和鼠的基因要用同一種限制酶切割核苷酸之間的________。

（2）圖中嵌合載體啟動(dòng)子位于基因的首端,它是________識(shí)別和結(jié)合的部位；終止子是________的終點(diǎn)；嵌合載體中還應(yīng)含有________，以便重組DNA的鑒定和篩選。

（3）圖中的“抗體分泌細(xì)胞”名稱是________，檢測(cè)目的基因在淋巴細(xì)胞中是否得到表達(dá)可用________技術(shù)。

（4）在制備單克隆嵌合抗體過(guò)程中要進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選的目的是________；第二次篩選的目的是________。

Answer 1

【答案】嵌合抗體的功能 嵌合抗體的結(jié)構(gòu) 磷酸二酯鍵 RNA聚合酶 轉(zhuǎn)錄 標(biāo)記基因 漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞） 抗原－抗體雜交 獲得雜交瘤細(xì)胞 獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞

【解析】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA），所以利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造時(shí)，首先必須根據(jù)預(yù)期鼠－人嵌合抗體的功能設(shè)計(jì)預(yù)期嵌合抗體的結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，最終通過(guò)基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠－人嵌合抗體基因，然后導(dǎo)入鼠淋巴細(xì)胞中使其表達(dá)�；�因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因，其中啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始；終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。制備單克隆抗體需要進(jìn)行2次篩選，第一次篩選是在兩細(xì)胞融合后，目的是選出符合要求的雜交瘤細(xì)胞，而第二次篩選則是在雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)后，篩選得目的是為了選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（1）利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造時(shí)，首先必須根據(jù)預(yù)期嵌合抗體的功能，設(shè)計(jì)嵌合抗體的結(jié)構(gòu)；在Ig基因表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程中，人和鼠的基因要用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）圖中位于基因首端的嵌合載體啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位；終止子是轉(zhuǎn)錄的終點(diǎn)；此外嵌合載體中還應(yīng)含有標(biāo)記基因，以便重組DNA的鑒定和篩選。

（3）分泌抗體的是漿細(xì)胞，檢測(cè)目的基因在淋巴細(xì)胞中是否得到表達(dá)可用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（4）在制備單克隆嵌合抗體過(guò)程中要進(jìn)行篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞；第二次篩選的目的是獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。