Question

【題目】[生物—選修1：生物技術(shù)實踐專題]纖維素酶是將纖維素水解成葡萄糖的一種復(fù)合酶，在生物燃料制作、布料處理中起重要作用。圖示纖維素酶的相關(guān)提取過程，請回答：

（1）從土壤中獲取纖維素分解菌時，應(yīng)選擇______________的環(huán)境采集土樣。

（2）篩選纖維素分解菌，可采用_________法。下列關(guān)于該培養(yǎng)基制備的敘述錯誤的有_________（雙選）

A.配制固體培養(yǎng)基時可加入瓊脂作為凝固劑

B.平板冷凝后需倒置的原因是讓培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水充分落入培養(yǎng)基

C.操作的順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌

D.培養(yǎng)基中能夠為菌體的生長提供碳源的是淀粉和纖維素粉

（3）實驗時，加入染色劑的方法有兩種，方法一是先培養(yǎng)微生物，再加入染色劑，方法二是在_____時就加入染色劑。兩種方法中會出現(xiàn)“假陽性反應(yīng)”的是_________________。

（4）在對纖維素分解菌進行計數(shù)時，為選出菌落數(shù)符合要求的平板，常需要在涂布前用______對樣品進行稀釋。若培養(yǎng)基被雜菌污染，通常會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際數(shù)目____________（填“高”或“低”），為檢測培養(yǎng)基是否被污染，可對其進行____________________________。

Answer 1

【答案】 富含纖維素 剛果紅染色 BC 倒平板 方法二 無菌水 高 空白培養(yǎng)

【解析】試題分析：熟記并理解微生物的實驗室培養(yǎng)、微生物的分離與計數(shù)等相關(guān)基礎(chǔ)知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上從題圖中提取信息并結(jié)合題意作答。

(1) 纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中，因此從土壤中獲取纖維素分解菌時，應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境采集土樣。

(2) 剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶水解后，剛果紅—纖維素復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。因此篩選纖維素分解菌，可采用剛果紅染色法。配制固體培養(yǎng)基時可加入瓊脂作為凝固劑，A項正確；待平板冷凝后將平板倒置，可以使培養(yǎng)皿表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)皿造成污染，B項錯誤；平板培養(yǎng)基配制的基本流程為：計算→稱量→溶化→調(diào)節(jié)PH→滅菌→倒平板，C項錯誤；培養(yǎng)基中的淀粉和纖維素粉都含有碳元素，因此能夠為菌體的生長提供碳源，D項正確。

(3) 實驗時，加入剛果紅染色劑的方法有兩種，一是先培養(yǎng)微生物，再加入染色劑；二是在倒平板時就加入染色劑。在方法二中會出現(xiàn)“假陽性反應(yīng)”。

(4) 在對纖維素分解菌進行計數(shù)時，為選出菌落數(shù)符合要求的平板，常需要在涂布前用無菌水對樣品進行稀釋。若培養(yǎng)基被雜菌污染，通常會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際數(shù)目高。為檢測培養(yǎng)基是否被污染，可對其進行空白培養(yǎng)。